研究背景:随着我国新生儿重症监护技术的发展,对于早产儿救治的成功率明显升高,然而,这些由于围产期因素导致脑白质损伤的儿童亦不断增加。脑白质损伤(white matter damage,WMD)是早产儿特有的脑损伤形式,是造成小儿神经系统并发症的主要病因。WMD所导致的小儿脑瘫的发生率约为10%,而认知障碍及行为发育等异常的发生率可高达50%、同时可伴视听功能异常等,故脑白质损伤日益受到重视。目前尚无特异性的方法治疗早产儿脑白质损伤。本研究拟通过临床随机对照试验结合动物实验的方法进行研究。临床采用随机对照试验,在常规基础康复的基础上加通督醒神针刺法,通过神经发育评估、颅脑影像学及电生理等方面检查了解疗效有无差异;动物实验采用宫内感染所致脑白质损伤幼鼠脑瘫动物模型,在运动训练的基础上加通督醒神针刺疗法干预,以神经行为学和大脑病理改变为主要观察指标。对通督醒神针刺法治疗早产儿脑白质损伤的疗效及可能的机理进行系统的研究。本课题共分为两部分,摘要如下:第一部分通督醒神针刺法治疗早产儿脑白质损伤的临床研究目的:本研究拟采用临床随机对照试验,选取脑白质损伤的早产儿,在常规基础康复治疗的基础上,增加通督醒神针刺疗法,对比分析神经运动发育改善情况以及头颅影像学的变化情况,了解通督醒神针刺疗法是否对早产儿脑白质损伤起修复作用,为早产儿脑白质损伤的诊治探寻一条更为有效的方法。方法:选取胎龄小于35周,存在脑白质损伤病史,年龄为纠正年龄3个月-12个月大的患儿,随机分为针刺组和对照组。纳入的研究对象均进行常规基础康复治疗,在此基础上针刺组增加通督醒神针刺疗法。研究对象在研究开始及结束时均进行头颅MRI及弥散张量成像(Diffusion Tensor Imaging,DTI)检查,了解大脑的影像学变化情况;并采用Gesell发育诊断量表、粗大运动功能测试量表(GMFM-88)评估量表了解神经运动发育情况。行脑电图检查、视听觉诱发电位检查检查,了解可能存在的并发症情况。观察增加通督醒神针刺疗法,是否对早产儿脑白质损伤患儿的头颅影像学的结构、智力水平、神经运动功能以及神经电生理功能等方面的影响,通过对比分析了解通督醒神针刺疗法是否对早产儿损伤的脑白质起修复作用。结果:1.干预治疗后,两组患儿脑损伤的程度比较无显著性差异(P>0.05);两组患儿治疗后的丘脑及额叶的FA值的有显著性差异(P<0.05)。针刺组治疗前后的丘脑及额叶的FA值的有显著性差异(P<0.05)。与对照组比较,针刺组患儿在治疗后的Gesell量表中大运动、精细运动及社会适应治疗前后差值d有显著性增加(P<0.05);与对照组比较,针刺组患儿在治疗后GMFM-88量表中B区分值显著性增加(P<0.05)。两组患儿在EEG、BAEP及VEP的结果进行卡方检验,无显著性差异(P>0.05)。两组患儿在治疗后诊断脑性瘫痪、癫痫、听觉障碍、视力障碍、精神发育迟滞等合并症比例的比较无显著性差异(P>0.05)。2.针刺组出生体重、出生胎龄及入组年龄与针刺组的社会适应、大运动及精细动作DQ差值d有显著的相关性。入组头围与针刺组的社会适应、大运动DQ差值有显著相关性(P<0.05)。结论:通督醒神针刺疗法配合常规康复治疗对早产儿脑白质损伤有良好的疗效,该针刺疗法通过腧穴的刺激,疏通督脉,并经各级神经调节和整合,兴奋脑部的激活区,醒神开窍,促进早产儿受损脑白质功能的修复,提高运动能力,尤其坐位立直及平衡的建立,改善精细运动,提高认知能力。第二部分通督醒神针刺治疗宫内感染致早产脑损伤幼鼠的实验研究目的:通过建立宫内感染所致早产脑损伤的动物模型,探讨通督醒神针刺法对早产脑损伤幼鼠行为能力的影响及相关蛋白的表达情况。方法:对孕鼠腹腔注射脂多糖以制备早产脑损伤幼鼠的动物模型,将早产幼鼠随机分为四组:单纯针刺组(A组)、单纯运动干预组(B组)、综合干预组(C组)和造模未干预组(D组),将未造模组孕鼠所产无早产的正常幼鼠设为对照组。幼鼠出生第7天行神经功能缺损检查,采血检测血清Tau蛋白后分别给予相应的运动训练及通督醒神针刺治疗,于28日龄时对各组幼鼠进行行为能力检查,再次采血侧血清Tau蛋白,之后取幼鼠海马组织做石蜡切片,行HE染色及透射电镜检查,了解海马组织的病理形态改变情况,免疫组织化学染色检测Tau蛋白的表达,免疫荧光染色观察GFAP蛋白的表达情况。结果:与正常足胎龄幼鼠比较,宫内感染所致早产脑损伤幼鼠运动行为能力下降,海马CA1区神经元变性、坏死比例增加,线粒体损伤程度重,Tau蛋白及GFAP蛋白表达增加。与模型未干预组比较,针刺可改善早产脑损伤幼鼠的运动行为能力,降低Tau蛋白及GFAP蛋白表达,减轻海马神经元变性坏死及线粒体的损伤程度。针刺配合运动训练的疗效优于单纯针刺治疗。结论:通督醒神针刺疗法可改善宫内感染致早产脑损伤幼鼠的行为能力、血清学指标,对早产幼鼠的脑损伤起到一定神经修复能力,具有一定的神经保护作用,其机制可能与该针刺疗法抑制调节Tau蛋白的过度磷酸化,减少病理性Tau蛋白在神经元以及神经胶质细胞内的蓄积,抑制星形胶质细胞的反应性增生,进而改善其脑组织病理结构,促进其脑功能的恢复,进而改善运动行为能力。