目的:根尖周炎主要是一种由细菌感染引起的炎症性疾病,其病理特征为炎症性骨吸收。破骨细胞的主要功能是骨吸收。研究表明,多种细胞、细胞因子和关键因子的协同作用调控着破骨细胞的分化和成熟过程。本实验通过探究c-fos对单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化过程的作用及可能的表观遗传学作用机制,为深入认识根尖周炎骨质破坏分子机制提供新的理论依据。方法:1、用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)和核因子κB受体活化素配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)诱导单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞分化,分别培养0天、1天、2天、3天后,利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞的形成,同时采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测c-fos和破骨细胞分化相关基因核因子κB(NF-κB)、小眼畸形相关转录因子(MITF)、活化T细胞细胞质核因子1(NFATc1)的m RNA表达水平。2、购买c-fos过表达质粒和c-fos小干扰RNA(si RNA),利用脂质体分别转染入RAW264.7细胞,培养6h后加入M-CSF和RANKL诱导培养3天,以TRAP染色观察破骨细胞形成,q RT-PCR检测c-fos和破骨细胞分化相关基因(NF-κB、MITF、NFATc1)的m RNA表达水平。3、利用DIANA、mi RDB、Pic Tar、Target Scan四个生物信息学数据库预测可能调控c-fos表达的micro RNA(mi RNA),并求交集。结果:1、c-fos在RAW264.7细胞向破骨细胞分化过程中逐渐上调。2、过表达c-fos促进RAW264.7细胞向破骨细胞分化,而抑制c-fos则抑制RAW264.7细胞向破骨细胞分化。3、生物信息学分析提示mi R-101a-3p和mi R-101b-3p可能是c-fos基因的上游micro RNA,从而参与了c-fos基因表达的调控。结论:c-fos促进单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化,其中mi R-101a-3p和mi R-101b-3p可能对c-fos基因表达具有调控作用。