荧光光度法测定肝素钠、溶菌酶

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采用了荧光光度法研究了药物分子(肝素钠、溶菌酶)与荧光试剂(吖啶橙、中性红、藏红O、耐尔蓝A)相互作用。本文以荧光分析法对肝素钠、溶菌酶的含量进行测定,考察了在最佳实验条件下,药物分子(肝素钠、溶菌酶)对荧光试剂(吖啶橙、中性红、藏红O、耐尔蓝A)的荧光产生的影响,从而分析荧光试剂与药物分子(肝素钠、溶菌酶)之间的相互作用,建立测定药物含量的新方法。本论文主要包括以下工作:1.吖啶橙荧光猝灭法测定痕量肝素钠在pH8.36的B-R缓冲溶液中,肝素使得吖啶橙的荧光产生明显猝灭,在一定范围内吖啶橙的荧光猝灭水平与肝素的浓度成正比,因此建立了痕量肝素测定的新方法-荧光猝灭法。在最佳实验条件下,方法的线性范围为0.01-2.0mg/L,检出限为0.00798mg/L。本法已应用于实际样品肝素钠注射液中肝素钠含量的测定,回收实验的回收率为97.4-104%。2.醌亚胺类碱性试剂荧光猝灭法测定痕量肝素钠采用了荧光光谱法研究了肝素钠与醌亚胺类碱性试剂(中性红、藏红O、耐尔蓝A)相互作用。研究结果显示:在最优实验条件下,在Britton-Robinson缓冲溶液中,肝素钠使得这些醌亚胺类碱性试剂的荧光发生了明显的猝灭,荧光试剂的荧光猝灭程度与肝素钠浓度成正比。线性范围和检出限分别为0.008~0.8mg/L和0.00330mg/L(藏红O体系)、0.06~2.0mg/L和0.0404mg/L(中性红体系)、0.05~1.0mg/L和0.0223mg/L(耐尔蓝A体系),其中以藏红O体系最为灵敏。本法用于实际样品肝素钠注射液效价的测定,成效满意。3.藏红O-肝素体系荧光光度法测定痕量溶菌酶在pH2.1的缓冲体系中,溶菌酶的存在可使藏红O-肝素体系的荧光明显增强,据此建立了痕量溶菌酶测定的新方法。在最佳实验条件下,方法的线性范围为0.7-10.0mg/L,检出限为0.1mg/L。方法应用于实际样品中溶菌酶含量的测定,回收率为98.9~101.8%。
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