7S和11S大豆球蛋白的分离及酶解研究

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本文综述了目前大豆蛋白质及其酶法水解产大豆肽的研究现状,讨论了大豆蛋白中的主要成分7S和11S的功能特性、分离方法及其应用前景。为了进一步探讨7S和11S两种功能性不同的大豆球蛋白的分离新工艺和方法,以及更好的解决大豆蛋白难酶解的问题,本文从大豆蛋白质原料的结构入手,选择低温脱脂大豆粕为原料,首先研究了7S和11S大豆球蛋白的分离方法,通过几种传统分离方法的比较实验,提出了一种碱提酸沉结合膜分离技术的分离新工艺,SDS—PAGE电泳分析表明碱提酸沉膜分离技术得到的7S和11S大豆球蛋白的相对纯度分别达到75.5%和84.7%,结果均优于传统方法。 其次,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶等几种常用的蛋白酶对分离的7S和11S球蛋白进行酶解比较实验,发现在相同条件下,7S比11S酶解后的酸溶多肽得率高,7S比11S相对更容易被酶解;通过扫描电镜和SDS-PAGE电泳分析7S和11S的酶解产物,表明7S和11S分子酶解前后的变化明显,但两种大豆蛋白经酶解作用后,均有相当部分未被酶解的蛋白分子残留在酶解残渣中,而酶解离心后的上清液中则已基本不存在原来的蛋白质大分子。 最后,结合大豆蛋白质中7S和11S的氨基酸组成及酶的专一性,并通过酶的筛选实验,选择碱性酶+中性酶为最佳水解酶。通过单因素实验,
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