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癌症是当前导致全球居民死亡的主要原因之一,抗肿瘤药物的开发已成为流行趋势。金属配合物具有抗肿瘤活性和促进细胞凋亡的特性,近年来引起了科学家的关注。目前,许多金属抗肿瘤临床药物都是以铂为基础的,但是铂类药物的毒副作用严重限制了它们的实际疗效和适用范围。经研究发现,金属铱药物比顺铂具有更好的治疗效果,随后金属铱抗肿瘤药物的设计、研发引起了人们的广泛兴趣。本实验室设计开发的铱(Ⅲ)抗肿瘤配合物[(η5-C5MeC6H4C6H5)Ir(C^C)Cl]PF6能够选择性杀伤、抑制肿瘤细胞,但其内在的作用机制尚不完全明确。本论文对金属铱(Ⅲ)配合物抗肿瘤机理及抗转移作用进行研究。1、本研究首先合成该金属铱(Ⅲ)配合物,利用核磁共振氢谱、核磁共振碳谱等对配合物结构进行鉴定。2、采用MTT法测定金属铱(Ⅲ)配合物对非小细型胞肺癌细胞(A549)、人肺鳞状细胞(L78)、人宫颈癌细胞(Hela)、以及人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的毒性作用,发现A549癌细胞具有较高的抗肿瘤活性。本研究使用激光共聚焦显微镜分析金属铱(Ⅲ)配合物的细胞定位,发现该配合物靶向溶酶体,并通过能量依赖性途径进入癌细胞内。再利用细胞流式仪对该配合物进行研究,结果表明,在药物作用后细胞凋亡率都显著增加,将细胞周期阻抑在G0/G1期,并对线粒体膜电位进行研究发现,该配合物诱导细胞内活性氧(ROS)激增,伴随caspase-3相对表达量上调。本研究利用western blot研究了诱导A549细胞凋亡的相关蛋白的表达,结果表明,溶酶体膜蛋白(LAMP-1)遭到破坏,组织蛋白酶(CB)释放到细胞质中,诱发线粒体功能性障碍,从而导致细胞色素C(Cyt C)的释放,并激活放大下游通路,促进细胞凋亡。据此,我们推断金属铱(Ⅲ)配合物的抗肿瘤机理可能是通过溶酶体-线粒体途径促进细胞凋亡。3、本研究采用细胞划痕法、迁移及侵袭等实验来考察了金属铱(Ⅲ)配合物对A549细胞的抗转移能力。采用免疫组织化学法和蛋白印迹法分析NEDD9、β-catenin表达水平。研究结果显示,金属铱(Ⅲ)配合物对A549细胞有明显地抗转移作用,可能通过作用于NEDD9降低肺癌细胞的增殖和转移。同时该金属铱(Ⅲ)配合物也可通过诱发β-catenin蛋白的表达,增加细胞膜表面粘性,降低A549细胞的转移能力。