介入微创式门静脉内间充质干细胞移植治疗肝硬化可行性的实验研究

来源 :中国人民解放军军医进修学院 中国人民解放军总医院 解放军总医院 解放军医学院 军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mokung1
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目的:肝硬化是大多数肝脏疾病共同的终末期表现,但目前对其治疗手段有限。近期研究发现,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有在体内、外分化成为肝细胞的潜能,输注MSCs具有减轻受损肝脏炎症反应、减少胶原沉积、促进组织塑型等功能:这些研究结果为治疗肝硬化提供了新的思路。本实验用介入技术将新西兰白兔的MSCs超选择性移植入门静脉分支内,观察MSCs在兔病理性肝脏(肝硬化)内的存活情况,评价该移植途径的可行性和安全性,观察移植MSCs对肝功能的影响,为临床应用提供参考依据。材料和方法:1.25只新西兰白兔,体重3±0.5kg,经皮下注射四氯化碳-橄榄油溶液制作肝硬化新西兰白兔模型;2.用密度梯度离心法和贴壁培养法分离纯化兔MSCs,BrdU标记;3.数字减影血管造影机(digital subtraction angiograpy,DSA)下将3F微导管超选择性插管插至门静脉二级分支,然后注入标记成功的MSCs;4.于移植前、后做血清肝功能检测(AST、ALT、TB、DB、TP、Alb),观察移植MSCs前、后的肝功能变化;于移植后3w取兔肝脏标本,荧光免疫组织化学染色检测移植细胞。结果:1.制作肝硬化动物模型结束后随机取实验动物肝脏标本,大体标本显示:肝脏较正常肝脏缩小,质地较硬,表面呈棕褐色;HE染色切片显示:肝细胞呈不同程度的浊肿变性、片状坏死,可见增生的纤维组织包绕假小叶。检测血清ALT明显升高(造模前为69.14±14.78U/L,造模后为144.44±53.20U/L),与造模前相比有统计学差异(t=6.539,p<0.05),AST(43.48±15.08U/L比44.61±8.05U/L)、TB(21.27±6.48umol/L比20.28±4.75umol/L)、DB(11.84±2.80 umol/L比11.52±2.95umol/L)、TP(68.47±3.53g/L比68.22±2.88g/L)、ALB(43.57±5.83 g/L比43.10±6.61g/L)变化无统计学差异(t值分别为:0.317、0.583、0.385、0.262、0.255,p值均大于0.05);2.密度梯度离心法和贴壁培养法分离纯化兔MSCs,传代至第3代后倒置显微镜观察显示MSCs形态及分布良好;免疫组化分析MSCs的BrdU标记率大于90%,可以满足移植示踪需要;3.荧光免疫组织化学分析显示,存活的16只动物中有13只结果为阳性,移植阳性率约为81.2%(13/16),证实移植的MSCs可以在病理性肝脏组织内存活。4.移植MSCs至病理性肝脏(肝纤维化)后,血清ALT下降(146.96±63.12 U/L比101.26±39.23 U/L),与移植MSCs前相比有统计学差异(t=2.459,p<0.05),AST(44.89±7.95 U/L比42.35±16.35U/L)、TB(19.66±4.32umol/L比20.87±5.32umol/L)、DB(11.37±2.70umol/L比11.79±2.72umol/L)、TP(68.57±3.07g/L比69.13±3.38g/L)、ALB(41.93±5.95g/L比42.04±5.37g/L)变化无统计学差异(t值分别为:0.558、0.691、0.437、0.488、0.059,p值均大于0.05)。结论:超选择性门静脉分支内移植MSCs后,移植细胞可以在纤维化受体肝脏组织内存活,移植3w后MSCs存活率达81.2%;反映肝功能受损的指标(AST)较移植前有一定程度改善。此项实验研究提示:通过介入技术做超选择性门静脉分支内MSCs移植可以作为一项治疗肝硬化的新手段,但需要在提高移植细胞存活率、客观评价疗效(改善肝脏功能)等方面做进一步工作。
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