戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)可导致病毒性肝炎——戊型肝炎(HepatitisE,HE)。戊型肝炎病毒在许多国家都有较广泛的流行。戊型肝炎病毒的衣壳蛋白含有660个氨基酸,该蛋白的截短蛋白E2(a.a.394-606)包含宿主识别病毒所必需的结构域,并且含有免疫优势表位,对E2进行改造,将其N端延长至368位氨基酸可得到类病毒颗粒p239,并且表达出可以在体外组装成颗粒的p239蛋白采用大肠杆菌表达系统。p239蛋白即戊型肝炎疫苗,通过临床研究发现基因1型的疫苗可以对1/4型的病毒感染具有良好且持久的保护。本研究主要目的是对戊型肝炎疫苗广谱保护性的分子机制进行研究,通过应用高效抗原特异性人源单克隆抗体筛选平台,从疫苗免疫者外周血中筛选出相应抗体并进行鉴定。主要方法是使用分选型流式细胞仪分选获得PBMC中抗原特异性的记忆B细胞,对其进行单细胞RT-PCR获得抗体序列,最终通过表达及筛选获得34株戊型肝炎特异性的人源抗体。之后对获得的HEV疫苗接种者的特异性抗体性质进行检测,通过检测发现超过80%的抗体与不同基因型的p239蛋白结合活性都较强,88.24%的抗体与1/4型的p239蛋白具有相当的结合活性。94.12%的抗体都具有中和活性。对抗体识别的表位进行研究,发现大部分抗体识别C2表位,提示C2表位为人源抗体的免疫优势表位。C2表位的敏感性氨基酸在不同基因型病毒中具有保守性。综上所述,本研究通过抗原特异性人源单克隆抗体筛选平台,成功筛选到抗原特异性的人源抗体,为研究多种病原体相关抗体打下基础;通过对人源抗体的性质检测及分析,发现HEV疫苗高保护率及广谱保护性的原因,这可以进一步通过深度测序的方法对抗体的演化过程进行分析,也可以为其他高保护率疫苗的设计提供理论支持。