论文部分内容阅读
大白菜—结球甘蓝异附加系由于结球甘蓝外源染色体的添加,使得异附加系表现出不同于受体亲本的特征特性。本研究利用来自于基因转录区、与功能基因紧密连锁的EST-SSRs标记,分析异附加系中导入了甘蓝的哪些EST序列。此外,本研究以附加结球甘蓝4号染色体的耐抽薹大白菜—结球甘蓝异附加系为材料,创制耐抽薹大白菜—结球甘蓝异附加系的DH群体。并对此后代群体进行了田间抽薹性鉴定,初步获得了耐抽薹材料。研究结果如下:
1.以4个大白菜品种、3个结球甘蓝品种及大白菜—结球甘蓝异附加系亲本的DNA为模板,对797个EST-SSRs标记进行筛选。结果表明:结球甘蓝与大白菜间具有多态性的标记304个,占所筛标记的38.14%。其中包括甘蓝有扩增产物而大白菜无扩增产物的标记26个,占所筛标记的3.26%;大白菜、结球甘蓝均有扩增产物,但二者扩增产物片段大小存在差异的标记278个,占所筛标记的34.88%。大白菜、结球甘蓝扩增产物相同的标记298个,占所筛标记的37.39%。
2.选取扩增条带清晰稳定的176个EST-SSRs标记进行功能分析,使用BLAST软件将EST序列与GO、KEGG、NR数据库比对,获得EST序列的注释信息。EST序列参与的生物学过程方面的功能主要集中在细胞过程、代谢过程、生物调节和刺激应答、系统形态构成、信号传导与信号传递系统、免疫系统等方面。
3.利用89个具有多态性的EST-SSRs标记分析大白菜—结球甘蓝异附加系,结果表明:在附加系中扩增出甘蓝相应产物的标记共计33个:AC1d有3个,AC2有1个,AC3有5个,AC3d有3个,AC4有3个,AC5有2个,AC7和AC7d有3个,AC8和AC8d有6个,AC9有7个。
4.辐射诱变耐抽薹大白菜—结球甘蓝异附加系AC4开花初期的花序并收集辐射后的新鲜花粉,授于其未经辐射诱变的适宜花蕾,收获种子M1。
5.对辐射诱变自交种M1的1143棵单株进行田间抽薹性调查,结果显示:不同辐射剂量与M1群体抽薹性的分离无明显规律。从中选出40株耐抽薹和4株较易抽薹的M1植株,取其适宜花蕾进行游离小孢子培养,获得了511个DH株系。
6.对448(511)个DH株系进行田间抽薹性调查,结果表明:花粉辐射获得的M1植株的DH群体抽薹性分离与花粉辐射剂量无显著关系。从M1的DH群体中选取38个耐抽薹株系和18个早抽薹株系。为耐抽薹大白菜—结球甘蓝异源易位系的创制及耐抽薹分子机制的研究提供了材料。