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体细胞核移植（somatic cell nuclear transfer，SCNT）可以快速大量复制具有优良数量、质量性状家畜个体，是一项有着广泛应用前景重要胚胎工程技术。本实验以提高猪SCNT效率为中心，从三个方面对猪SCNT重编程、胚胎发育影响因素及其分子细胞机制进行研究：（1）分析猪SCNT影响因素；（2）优化猪SCNT胚胎培养体系并研究胚胎发育相关机制；（3）制备嵌合体猪。对作者所在课题组2008年至2012年猪胚胎移植数据统计分析发现：春季进行胚胎移植成功率远高于冬季（33.6%vs.18.6%，p=0.006）；胚胎移植时未排卵代孕母猪怀孕成功率高于已排卵受体母猪（32.0%vs.17.5%，p=0.004）；流产主要集中出现在胚胎移植后第27天到34天之间；根据生存分析结果，可以推测正常受精母猪和代孕母猪分别在117天和125天前产仔完毕；代孕母猪怀孕周期与产仔数呈负相关关系。为了提高克隆效率，使用维生素C、丙戊酸钠（valproic acid，VPA）和Scriptaid对猪SCNT胚胎进行处理，并对相应分子细胞机制进行探索。50μg/ml维生素C处理猪SCNT胚胎15小时，囊胚形成率显著高于对照组（36.0%vs.11.5%, p<0.05）。实时定量检测结果显示，维生素C处理后，囊胚Oct4、Sox2和Klf4表达水平上调。与对照组相比，1mM VPA处理14-16小时可以显著提高SCNT胚胎囊胚形成率（31.8%vs.11.4%, p<0.05）以及克隆效率：VPA处理组中14头受体母猪怀孕（14/20，70%），克隆效率为0.40%；对照组中，6头受体母猪怀孕（6/18，33%），克隆效率为0.18%。与未处理对照胚胎相比，500nM Scriptaid处理SCNT胚胎15小时能促进SCNT胚胎体外囊胚形成（12.2%vs.27.7%, p<0.05）；Scriptaid处理胚胎在二细胞、四细胞和囊胚阶段acH3K14乙酰化水平上升。分别以表达EGFP的雄性长白猪胎儿成纤维细胞和表达tdTomato的雌性松辽黑猪胎儿成纤维细胞作为SCNT供体细胞，并用1mMVPA对重构胚胎进行处理。胚胎发育至四细胞阶段时，对这两种SCNT胚胎以2:2比例进行聚合。聚合胚胎发育到囊胚阶段后进行胚胎移植，成功获得具有明显毛色嵌合特征的克隆猪。