【摘 要】
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钙连接蛋白是定位于内质网膜上的一种分子伴侣,参与糖蛋白的折叠与质量控制。在哺乳动物中,钙连接蛋白是内质网主要的钙离子结合蛋白之一。尽管该蛋白存在结合钙离子的区域,
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钙连接蛋白是定位于内质网膜上的一种分子伴侣,参与糖蛋白的折叠与质量控制。在哺乳动物中,钙连接蛋白是内质网主要的钙离子结合蛋白之一。尽管该蛋白存在结合钙离子的区域,但是它参与钙平衡以及钙离子信号通路的证据还很有限。本论文以模式真菌构巢曲霉为材料,运用遗传学与分子生物学的方法,研究钙连接蛋白在构巢曲霉应对内质网压力(二硫苏糖醇即DTT和高温)时的生物学功能。本课题研究发现,在DTT/高温刺激下,编码钙连接蛋白的clxA,在转录水平会有一个瞬时升高现象;敲除clxA之后在DTT压力或是高温(42℃)压力下菌株均会表现出产孢显著减少,相比较之下,在正常的培养条件下,野生型与△clxA菌株无明显区别。我们研究还发现,外加钙离子可以恢复产孢缺陷,但未降低曲霉在DTT刺激下的UPR(unfolded protein response)水平;测钙实验表明ClxA蛋白在维持胞内钙平衡发挥着作用。通过敲除CchA/MidA(定位于质膜上的钙通道)、PmrA(定位于高尔基体上的钙泵)这两个钙信号途径中的主要组分扰乱钙平衡,加剧了△clxA菌株对DTT和高温的敏感程度。综上所述,我们的研究结果表明,钙连接蛋白除了作为分子伴侣之外,在维持钙平衡方面同样发挥着调节作用,在构巢曲霉适应内质网压力方面,钙连接蛋白连同钙信号途径一起发挥着作用。
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