研究背景:胰腺癌是发病隐匿且恶性程度极强的恶性肿瘤,其恶性增殖所需的大量多胺可通过细胞膜上高表达的多胺转运系统（Polyamine transport system,PTS）摄取获得。PTS可转运多胺及多胺衍生物,基于此,本课题组前期创新性设计并合成了荧光素精胺衍生物（N2）和光敏剂精胺衍生物（N3）。研究发现,N2和N3通过PTS进入胰腺癌PANC-1细胞,并在PANC-1细胞中大量富集。并且,N3介导的光动力治疗（Photodynamic therapy,PDT）可明显抑制PANC-1细胞的活力。目的:本课题在前期研究的基础上,评价N3介导的PDT（N3-PDT）对胰腺癌Bx PC-3细胞的抑制效果。随后,探索N3在裸鼠体内的适用剂量和光照条件,并评价N3-PDT对裸鼠胰腺癌移植瘤的抑制效果,为N3-PDT应用于胰腺癌的临床治疗提供科学依据。方法:（1）采用CCK-8法评价N3-PDT对Bx PC-3细胞的抑制效果。（2）采用分光光度法检测经光照后N3的单线态氧产率。（3）采用荧光分光光度法和荧光显微镜分析经光照后N3在胰腺癌细胞内的活性氧产率。（4）以未荷瘤的裸鼠为对象,给予不同剂量N3,避光,观察裸鼠生存率,并采用HE染色观察各组裸鼠重要组织器官的形态,初步确定N3的适用剂量。（5）构建裸鼠胰腺癌细胞移植瘤（CDX）模型,给予不同剂量的N3,避光,观察荷瘤裸鼠对N3的耐受情况,并采用HE染色观察各组裸鼠重要组织器官的形态,评价N3对胰腺癌移植瘤的作用效果,并明确N3用于体内PDT的适用剂量。（6）以未荷瘤的裸鼠为对象,通过观察光照未给予N3和给予N3的裸鼠皮肤,评价不同光源能量、光照时长和给予N3后光照时间、光照时长及次数对裸鼠皮肤的损伤情况,确定N3-PDT的光照条件。（7）以裸鼠胰腺癌CDX模型为对象,选用已明确的N3剂量和光照条件进行N3-PDT,观察N3-PDT对裸鼠移植瘤的抑制效果,并采用HE染色观察各组裸鼠重要组织器官的形态和肿瘤组织的病理特征,免疫组织化学技术观察各组裸鼠肿瘤组织中Ki-67的表达情况。结果:（1）经不同浓度的N3孵育Bx PC-3细胞后,评价N3-PDT对Bx PC-3细胞的抑制效果。结果发现,40 n M的N3经光照后对Bx PC-3细胞具有抑制作用,且抑制作用随着N3浓度的增加而升高。而且在该剂量下,避光处理的N3对Bx PC-3细胞无明显抑制作用。（2）在不同浓度N3溶液中加入DPBF探针,经光照后,采用分光光度计检测单线态氧产率。结果发现,40 n M的N3经光照后即可产生单线态氧,且单线态氧的产率随着N3的浓度和光照时间增加而升高。（3）经不同浓度N3处理胰腺癌细胞,光照后加入DCFH-DA探针,采用荧光分光光度法计检测细胞内的活性氧产率。结果发现,活性氧含量随着N3的浓度增加而增强。倒置荧光显微镜下观察发现,孵育N3后经光照的胰腺癌细胞中活性氧产率升高。（4）裸鼠腹腔注射不同剂量的N3,避光饲养,观察N3对裸鼠的影响。结果发现,当N3的剂量小于3.35 mg/kg时,避光N3对裸鼠的生存无明显毒性影响,对裸鼠的重要组织器官无明显毒性作用。（5）胰腺癌CDX模型腹腔注射不同剂量的N3,避光饲养。结果发现,与对照组相比,当N3的剂量小于3.35mg/kg时,避光N3对荷瘤裸鼠的生存无明显毒性影响,对荷瘤裸鼠的重要组织器官无明显毒性作用。且该浓度的N3对肿瘤的生长亦无明显影响。（6）以未荷瘤裸鼠为对象,通过评价各光照因素对裸鼠皮肤的影响,确定N3-PDT所需光照条件。结果发现,裸鼠皮肤损伤程度会随着光源功率、光照时间、N3剂量、给药后进行光照的时间间隔以及光照次数的增加而加重。因此,综合评判各光照因素后,明确了N3-PDT所需光照条件为给予N3 2 h后采用2 W/cm~2光源光照2 min,且光照三次后,裸鼠受损皮肤在2周内可基本恢复。（7）以裸鼠胰腺癌CDX模型为对象,评价N3-PDT对裸鼠移植瘤的抑制效果。结果发现,经一周PDT后,N3+L组（进行N3-PDT处理的荷瘤裸鼠）的小鼠肿瘤体积明显减少,肿瘤重量明显低于DMSO+L组（仅给予DMSO进行光照的荷瘤裸鼠组）。病理学检测结果显示,N3+L组裸鼠的肿瘤组织形态被破坏,Ki-67的表达明显降低,提示该组裸鼠移植瘤的生长被抑制。并且,N3-PDT对荷瘤裸鼠的生长无明显影响,对荷瘤裸鼠的重要组织器官无明显毒性作用,且裸鼠受损皮肤在2周内基本恢复。结论:经光照后,N3在40 n M的浓度下可产生单线态氧及细胞内的活性氧,且单线态氧产率与光照时间和N3浓度成正相关。N3-PDT可明显抑制Bx PC-3细胞的增殖能力,并且N3-PDT对裸鼠胰腺癌移植瘤亦具有明显的抑制效果。