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目的:探索新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌与死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子甲基化的相关性,为维吾尔族子宫颈鳞癌的早期诊断和高发的分子机制奠定基础。
方法:①运用甲基化特异性PCR(MSP)法检测60例子宫颈鳞癌病人以及40例正常子宫颈的DAPK启动子甲基化,分析其与临床的关系。②运用逆转录PCR检测15例子宫颈鳞癌和15例正常子宫颈组织DAPK基因的mRNA表达水平。③用PCR检测18例子宫颈鳞癌和38例正常子宫颈组织中HPV16E6感染状况。④运用massarray技术检测22例子宫颈鳞癌和22例正常子宫颈组织的不同位点的甲基化率。
结果:⑴维吾尔族子宫颈鳞癌中DAPK基因启动子甲基化检出率为63.3%(38/60),其中临床Ⅰ期66.7%(10/15),临床Ⅱ期61.5%(16/26),临床Ⅲ期63.2%(12/19),对照组中CIN17.6%(3/17),正常未检测到甲基化;病例组和对照组甲基化率有差别,病例组中不同临床分期之间甲基化率无差别。⑵逆转录PCR显示正常子宫颈组织中100%(15/15)可看到mRNA的条带,子宫颈鳞癌组织中有26.7%(4/15)可看到mRNA条带。⑶HPV16E6在子宫颈鳞癌中为44.4%(8/18),在正常子宫颈组织中为15.8(6/38)。⑷massarray可检测到22例子宫颈鳞癌中有12例不同位点发生了不同程度的甲基化率,22例正常子宫颈组织中只有2例CIN检测到了不同位点的不同甲基化率。
结论:①DAPK1基因启动子甲基化可以成为维吾尔族子宫颈鳞癌早期诊断的生物学标志物。②基因甲基化后,会导致mRNA表达降低或消失。③HPV感染和基因甲基化在肿瘤的形成中是相对独立的两个因素。④基因的甲基化在基因不同位点上,甲基化率不一样。