鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumanii,Ab)是医院内分离率位居第二的常见于人类感染的非发酵菌。其常会造成严重的医院内感染,包括皮肤和软组织的感染、伤口感染、泌尿系统感染、继发性脑膜炎、呼吸机相关性肺炎和菌血症等并导致人类死亡。然而对于动物源鲍曼不动杆菌引起的动物感染或者带菌情况的报道远远没有人类多,尤其禽类感染鲍曼不动杆菌的情况鲜有报道,故探明其在禽类的感染率或者有否人源菌株感染禽类等流行病学情况具有重要的现实和公共卫生意义。本课题首次开展了不动杆菌在家禽中感染情况的调查研究,并对流行菌株进行系统发育分析。此外,通过对外膜蛋白A(OmpA)进行原核表达,分析其免疫原性,并基于此建立了间接ELISA方法,以及进行了初步应用。本研究对2014年9月至2015年10月的发病蛋鸡的肝脏、脾脏、肺、气管和十二指肠等450份病料进行鲍曼不动杆菌的分离鉴定。对分离菌进行了形态特征、培养特性的观察、生化试验、药敏试验、小鼠致病性试验和特异性基因检测,结果共分离到2株鲍曼不动杆菌,流行率仅0.44%(95%CI,0.1-1.6)。2株鲍曼不动杆菌均对多种抗生素耐药,且对小鼠有较强的致病性,LD50均达到7.09×107CFU/0.5 m L。这为研究鲍曼不动杆菌对禽类的致病性以及其感染的流行情况等提供了材料基础。为了更好的认识禽源鲍曼不动杆菌的遗传进化地位及其溯源,本研究基于管家基因rec A、gyr B、rpo B结合16S r RNA基因对2株禽源分离株进行系统发育分析。结果表明,进化树分析发现2株禽源分离株与人源鲍曼不动杆菌遗传距离最近,与大肠杆菌遗传距离最远,核苷酸同源性分析显示禽源分离菌核苷酸同源性均与人源鲍曼不动杆菌的最高,高达92%-99.9%。以上结果说明禽源分离菌可能由人源菌株进化而来,这显示了重要的公共卫生意义。证明了rec A、gyr B、rpo B基因联合16S r RNA基因可用于不动杆菌属菌种鉴定,探索了一种鉴定该菌的新方法。通过设计特异性引物,扩增OmpA基因,克隆至原核表达载体p ET28a(+),构建重组质粒p ET28a-OmpA,转化至BL21菌体进行诱导表达。通过条件摸索,确定最佳诱导条件,之后采用琼脂糖Ni柱纯化重组蛋白,并对其进行Western blot分析。SDS-PAGE结果表明,在37℃经0.4 mmol/L IPTG诱导5 h的条件下,重组菌株能表达出约41 k Da的融合蛋白,与预期大小一致。Western blot分析显示,该融合蛋白具有良好的免疫反应性。以上结果为进一步建立快速简便的免疫学检测方法和进行血清流行病学调查奠定基础。以纯化的OmpA蛋白作为抗原进行包板,建立了针对抗鸡鲍曼不动杆菌抗体的间接ELISA检测方法。本文所建立的ELISA方法具有良好的重复性和特异性,对来自河南不同地市的399份鸡血清进行鲍曼不动杆菌抗体的检测,结果显示阳性率有3.75%。本研究所建立的ELISA方法可用于临床样品的血清学检测,并为鸡群中鲍曼不动杆菌的临床诊断和流行病学调查提供了有效的检测方法。