论文部分内容阅读
背景:肠缺血/再灌注(intestinal ischemia reperfusion, II/R)损伤是外科危重症之一对全身的影响远远超过局部。胃肠道引起的远隔脏器损伤的保护是临床研究热点之一。新近研究显示:肠道屏障损害、菌群移位、氧化应激和炎症介质激活作用于远隔器官是肠缺血/再灌注引起远隔脏器损伤的重要原因。人参皂苷Rbl是人参主要活性成分之一,前期研究证实:人参皂苷Rb1具有抗氧化应激的功效,能减轻多种脏器缺血/再灌注损伤,然而是否能减轻肠缺血/再灌注损伤引起的急性肺损伤尚未阐明。Nrf2/HO-1通路作为至今为止发现的最为重要的内源性抗氧化应激通路,其调控机体对抗外来异物和氧化损伤的作用目前已在多个系统疾病研究中得到证实。但对肠缺血/再灌注所致远隔脏器损伤的具体保护机制尚待探讨,人参皂苷Rbl的脏器保护功能机制亦需要进一步研究,Nrf2/HO-1信号通路在肠缺血/再灌注所致远隔脏器损伤的保护作用及其机制研究亟待阐明。第一部分:Nrf2/HO-1通路在肠缺血/再灌注致急性肺损伤的作用及分子机制目的:探讨Nrf2/HO-1通路在肠缺血/再灌注致急性肺损伤的作用及分子机制。方法:成年雄性C57BL/6J小鼠随机分为三组:假手术组(S组,仅分离SMA);肠缺血/再灌注组(I/R组);ATRA+再灌注组(ATRA+I/R组,实验前2w经腹腔注射ARTA10mg/kg/d)。采用小鼠阻断SMA45min再灌注2h肠缺血/再灌注模型。Western blot检测肺组织Nrf2、HO-1表达变化;ELISA法检测肺组织TNF-α、IL-6、IL-10水平;SOD活性及MDA含量;检测肺湿/干比以及肺组织病理损伤评分。结果:肺组织Nrf2、HO-1表达:与S组比较,I/R组Nrf2、HO-1表达均显著增加(P<0.05), ATRA+I/R组Nrf2表达增加(P<0.05),与I/R组比较,ATRA+I/R组HO-1表达降低(P<0.05);TNF-α、IL-6、IL-10水平及MDA含量、SOD活性:与S组相比,I/R组与ATRA+I/R组TNF-α、IL-6、MDA显著增加而IL-10、SOD明显降低(P<0.05);肺湿/干比及肺组织病理损伤程度:与S组相比,I/R组和ATRA+I/R组肺湿/干比以及病理损伤评分显著升高(P<0.05)。结论:肠缺血/再灌注可引起急性肺损伤,可能与Nrf2/HO-1通路有关。第二部分:人参皂苷Rb1在肠缺血/再灌注致急性肺损伤的作用及分子机制目的:探讨人参皂苷Rbl在肠缺血/再灌注致急性肺损伤的作用及分子机制。方法:成年雄性C57BL/6J小鼠随机分为三组:再灌注+Rb1组(I/R+Rb1组,再灌注前腹腔注射人参皂苷Rb160mg/kg); ATRA+再灌注组(ATRA+I/R组,实验前2w经腹腔注射ARTA10mg/kg/d); ATRA+再灌注+Rb1组(ATRA+I/R+Rb1组,实验前2w经腹腔注射ARTA10mg/kg/d,再灌注前,腹腔注射人参皂苷Rb160mg/kg)。采用小鼠阻断SMA45min再灌注2h的肠缺血/再灌注模型。Western blot检测肺组织Nrf2、HO-1表达变化;ELISA法检测肺组织TNF-α、IL-6、IL-10水平;SOD活性及MDA含量;检测肺湿/干比以及肺组织病理损伤评分。结果:肺组织Nrf2、HO-1表达:与I/R+Rb1组比较,ATRA+I/R组、ATRA+I/R+Rb1组肺组织中Nrf2表达显著降低(P<0.05),HO-1表达明显低于I/R+Rb1组(P<0.05);TNF-α、IL-6、IL-10水平及MDA含量、SOD活性:与I/R+Rb1组比较,ATRA+I/R组、ATRA+I/R+Rb1组TNF-α、IL-6、MDA显著升高而IL-10、SOD明显降低(P<0.05);肺湿/干比及肺组织病理损伤程度:ATRA+I/R组、ATRA+I/R+Rb1组肺湿/干比以及病理损伤评分显著高于I/R+Rb1组(P<0.05)。结论:人参皂苷Rb1能通过激活Nrf2/HO-1通路减轻肠缺血/再灌注所致肺损伤。