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研究背景和目的:绒癌是主要发生于生育年龄妇女的恶性肿瘤，也是人类最早治愈的实体肿瘤之一。大部分绒癌对化疗敏感，成为主要的治疗手段，对药物耐药是治疗失败的最主要原因。如何增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，同时而不增加其毒副作用，即有效增加化疗药物抗肿瘤作用的同时保证患者对化疗副作用耐受是亟待解决的问题。
线粒体在诱导细胞凋亡过程中有重要作用。氯尼达明(LND)，直接作用于线粒体，能跨越目前经典的耐药途径诱导细胞凋亡，导致敏感和耐药肿瘤细胞死亡。同时，氯尼达明没有传统抗肿瘤药物的常见副作用，如骨髓抑制、肝肾毒性、脱发、胃肠道粘膜坏死等，也不导致体细胞和生殖细胞突变。LND和多种化疗药物有协同抗肿瘤作用，毒副作用不叠加，在联合应用中存在潜在价值。
目前国内外尚没有关于LND单药和联合化疗治疗滋养细胞肿瘤的报道。更生霉素(Dactinomycin，KSM)是治疗滋养细胞肿瘤常见药物，本研究目的是明确LND对于滋养细胞肿瘤抗肿瘤作用机制以及评估单药和联合KSM用药的有效性。
研究方法:
1.采用alamarBlue法观察LND、KSM单药和联合用药作用于JEG-3和BeWo绒癌细胞对细胞致死率的影响。
2.JEG-3和BeWo绒癌细胞中，观察LND对肿瘤细胞线粒体膜电位改变、细胞色素C释放和细胞凋亡的影响，明确LND对绒癌细胞的作用机制。
3.建立绒癌裸鼠移植瘤模型，采用LND单药和联合KSM用药，观察移植瘤体积、重量、病理形态学改变、绒癌细胞β-HCG合成分泌水平、裸鼠血β-HCG水平和骨髓抑制情况，进一步了解LND单药和联合KSM用药对绒癌细胞的作用效果以及毒副作用。
研究结果:
1.用alamarBlue法测定LND作用于JEG-3和BeWo绒癌细胞的细胞存活率显示，随着LND用药浓度的增加，抑制肿瘤细胞增殖作用逐渐增加。测定LND单药、KSM单药和联合用药的肿瘤细胞半数致死量，即IC50，结果表明LND对两种绒癌细胞均有抑制瘤细胞增长的作用，联合KSM用药，明显增加KSM的抑瘤作用。说明LND具有抑制JEG-3和BeWo绒癌肿瘤细胞增殖作用，和KSM联合用药较单独用药效果更明显。
2.LND作用于JEG-3和BeWo绒癌细胞，导致线粒体膜电位(Δψm)下降、细胞色素C向胞浆释放、pro-caspase3增加、caspase3活化、细胞核出现典型的凋亡形态学改变，DNAladder形成。说明LND对JEG-3和BeWo绒癌细胞有诱导凋亡作用。
3.移植瘤裸鼠模型中，LND、KSM单药和联合用药均能使移植瘤体积、重量减小，联合用药作用最明显。JEG-3绒癌细胞移植瘤的病理形态中见到大量出血和坏死。用药后裸鼠血β-HCG水平下降，绒癌细胞合成分泌β-HCG减少，联合用药组最明显。BeWo绒癌细胞移植瘤的病理形态中没有明显的肿瘤组织出血和坏死。裸鼠血β-HCG水平低，变化没有规律。LND和KSM单独或者联合用药对裸鼠外周血细胞计数没有影响，但是LND和对照组骨髓增生程度相同，均显示为增生极度活跃，KSM单药和LND+KSM联合用药组的骨髓增生活跃程度较前差，但是组间没有明显区别。说明LND在体内实验中能抑制绒癌移植瘤生长，与KSM联合用药抗绒癌细胞作用较单独用药更有效，同时没有骨髓抑制的副作用。
结论:
1.LND具有抑制JEG-3和BeWo绒癌细胞增殖的作用，联合KSM用药较单独用药效果更明确。
2.LND通过改变JEG-3和BeWo绒癌细胞内线粒体膜通透性、使细胞色素C向胞浆释放，激活caspase3途径诱导细胞凋亡。
3.LND没有明显的骨髓抑制作用。