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目的:1、建立稳定的无心跳供肝大鼠原位肝移植模型。2、在此模型的基础上,对比研究UW液、自制KLY液对无心跳供肝的保存效。方法:无心跳供肝大鼠肝移植模型是在目前最常用的“二袖套”法基础上加以改良。预先经供体阴茎背静脉输入1ml含肝素生理盐水(含肝素1250U/ml)使供体全身肝素化,然后采用先开胸钳夹大鼠心脏底部和胸主动脉的方法来建立供肝热缺血作为NHBD供肝模型。本实验采用随机原则将Wistar大鼠按热缺血时间分2大组,热缺血时间分别为10min(R10)、30min(R30)。每个大组分别用4℃的UW液和自制KYL液冷保存1h、3h、6h后行大鼠肝移植。在移植术后24h、3d两个时间点上检测大鼠体重变化、肝酶水平、放免法检测血清ET-1水平、抗体夹心ELISA法检测血清炎性细胞因子TNF-a与IL-1的浓度、常规HE染色病理学检查、观察大鼠生存率等多个方面比较自制器官保存液KYL液与UW液对NHBD供肝的保存效果。结果:(1)我们建立的NHBD模型,1周存活率80%。(2)在热缺血10min条件下,分别用UW液和KYL液对NHBD供肝冷保存1h、3h、6h,术后在24h、3d两个时间点上检测所得肝酶水平(AST、ALT)、ET-1水平、TNF-a水平、IL-1水平及术后短期存活率均无明显差异(P＞0.05)。说明KYL液在热缺血时间10min条件下,冷保存NHBD1h、3h、6h效果与UW液相当。(3)在热缺血时间30min条件下,分别用UW液和KYL液对NHBD供肝冷保存1h,术后在24h、3d两个时间点上检测所得肝酶水平(AST、ALT)、ET-1水平、TNF-a水平、IL-1水平均无明显差异(P＞0.05)。说明在热缺血30min条件下,用KYL液冷保存NHBD供肝1h效果与UW液相当。在冷保存3h、6h组各组间均存在明显差异(P＜0.05)。术后短期存活率明显下降。在冷保存3h、6h各组间,UW液效果优于KYL液。结论:(1)我们建立的NHBD供肝大鼠肝移植方法可作为NHBD供肝肝移植基础研究的良好模型。(2)在10min的热缺血时间条件下,用KYL液保存NHBD大鼠供肝完全可以耐受6h的冷保存时间。(3)在30min的热缺血条件下,用KYL液冷保存NHBD大鼠供肝1h的效果基本满意。冷保存时间3h时,效果开始明显变差。冷保存6h的NHBD效果更差。因此,建议在使用KYL液保存热缺血时间为30min以上的NHBD供肝时,冷保存时间尽可能控制在1h以内,最长不超过3h。(4)由于本实验是建立在动物实验的基础上,且样本量偏少,其实用价值有待进一步的实验及临床研究验证。