Ube2e3在小鼠胚胎发育阶段的表达分析

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanqingkuiyan
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小鼠泛素结合酶基因Ube2e3是一个生长抑制基因,其编码的蛋白Ube2e3参与泛素蛋白酶体水解系统并在成年小鼠的各组织中广泛表达。本研究通过实时定量RT-PCR及原位杂交技术,对小鼠Ube2e3基因在小鼠胚胎不同发育阶段的表达模式进行分析,并利用DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-2-deoxycytidine(5-aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂4-Phenylbutyric acid(4-PBA)处理NIH3T3细胞,初步探究Ube2e3表达的表观遗传调控机制。  生物信息学分析显示,Ube2e3基因是一个在进化上高度保守的基因;其蛋白在脊椎动物中也是高度保守的,鼠源Ube2e3和人源UBE2E3蛋白序列的相似性为100%;其核心结构域种间保守性高,氨基末端种间特异性强。原位杂交结果显示,在E10.5天小鼠胚胎中,Ube2e3的信号主要集中在脑、神经管、肢芽、腮弓等组织;而在E11.5天,Ube2e3的表达局限在脑、肢芽及体节处。在胚胎发育中后期,该基因表达主要分布在中枢神经系统和骨骼系统中,在舌、心、肺、肝中的表达较弱。定量表达分析结果表明,Ube2e3基因在小鼠胚胎发育中后期持续表达;在小鼠E15.5天各组织中,Ube2e3在脑中表达最强,肺、肝、肾次之,舌和心脏最弱;Ube2e3在 E12.5-E18.5天小鼠脑中呈现先升后降的表达趋势,表达最高峰从E14.5天持续到E16.5天。另外,在5-aza-CdR和4-PBA单独及联合处理的NIH3T3细胞中,Ube2e3的表达水平没有发生变化。  以上的结果说明Ube2e3是一个与胚期神经系统和骨骼发育相关联且在NIH3T3细胞中不受DNA甲基化和组蛋白乙酰化调控的基因。
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