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植物内生菌次生代谢产物是新型微生物资源,是寻找具有生物活性的新颖天然化合物的重要途径,特别是药用植物内生菌次生代谢产物,被认为可以解决植物生长缓慢和资源紧缺等问题。山药(Dioscorea opposite Thunb.)是药食同源植物,营养价值丰富,由此推断其内生真菌可产生活性化合物;天麻(Gastrodia elata Bl.)是传统名贵中药材,生长方式特殊,需要共生真菌促进种子萌发、提供营养,我们认为天麻种子内生菌与天麻共生真菌关系密切。本论文探究了山药内生菌芽枝状枝孢霉菌Cladosporium cladosporioides和天麻种子内生菌白囊耙齿菌Irpex lacteus次生代谢产物,论文内容共分为四章:第一章综述了天麻活性成分、天麻内生真菌次生代谢产物及蜜环菌次生代谢产物研究进展,为本课题提供研究背景及思路。第二章介绍了山药和天麻种子内生真菌的分离,筛选和菌种鉴定工作。本课题分别从山药和天麻种子中分离得到20株和22株内生真菌,对分离得到的内生真菌均采用PDB培养基进行初筛,得到具有丰富代谢产物的山药、天麻种子内生真菌分别为16株和10株。将16株山药内生真菌用山药液体培养基复筛,10株天麻种子内生真菌用加入天麻成分的混合PDB培养基复筛。筛选出宿主诱导培养条件下代谢差异性大,多样性好的山药目标菌株SY2×2和天麻种子目标菌株TM35×1,经基因序列测定分别为Cladosporium cladosporioides和Irpex lacteus。第三章描述了山药内生真菌Cladosporium cladosporioides用山药液体培养基发酵后代谢产物的分离纯化,结构鉴定及生物活性测定过程。共分离得到6个已知化合物:orcinotriol(1),1-(3,5-dihydroxyphenyl)propan-2-one(2),2-(methoxymethyl)benzene-1,4-diol(3),1-(3,5-dihydroxyphenyl)-4-hydroxypentan-2-one(4),vidarabine(ARA-A)(5),chrysogesides C(6)。对6个化合物做了体外抗菌活性实验,实验表明:化合物2对波兰青霉有较强抗菌活性,化合物4对小脆柄菇有较强抗菌活性,MICs值均为4μg/m L,化合物1,3-5对波兰青霉以及化合物1-4,6对深绿木霉有抗菌活性,MICs值均≤64μg/m L,所有化合物对小脆柄菇均有抗菌活性,MICs值介于4-32μg/m L之间。第四章描述了天麻种子内生真菌Irpex lacteus采用加入天麻的混合PDB培养基发酵所得的代谢产物的分离纯化,结构鉴定及生物活性测定过程。分离得到26个化合物,其中6个为新化合物:irpexlactin A(1),irpexlactin B(2),irpexlactin C(3),irpexlactin D(4),irpexlactin E(5),irpexlacin(6);20个为已知化合物:irlactin G(7),conocenol C(8),(3S,6R,7R)-tremul-1-ene-6,11,12-triol(9),11,12-dihydroxy-1-tremulen-5-one(10),neroplofurol(11),11,12-epoxy-5,6-secotremula-1,6(13)-dien-5,12-olide(12),irpexlacte B(13),2,3-dihydroxydodacane-4,7-dione(14),tremulenediols A(15),11,12-epoxy-10α-hydroxy-5,6-seco-1,6(13)-tremuladien-5,12-olide(16),ceriponol L(17),11,12-epoxy-12β-hydroxy-1-tremulen-5-one(18),(4R,5S)-5-hy-droxyhexan-4-olide(19),2,5-dihydroxybenzoic acid(20),p-hydroxy benzaldehyde(21),threo-4-hydroxyphenylpropan-7,8-diol(22),erythro-4-hydroxyphenylpropan-7,8-diol(23),cholesta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one(24),ergosterol peroxide(25),(3β,5α,6β,22E)-ergosta-7,22-diene-3,5,6-triol(26)。对化合物1-14做了体外抗菌活性实验,实验结果显示:化合物14对三株病原菌均表现出一定的抗真菌活性,MICs≤32μg/m L,而对蜜环菌无明显的抗真菌活性,MICs为128μg/m L。化合物1,8和13对波兰青霉,化合物2,7和11对小脆柄菇有一定抑制活性,MICs为8μg/m L。因此白囊耙齿菌可产生抗病原菌的化合物,维持植物的健康。通过HPLC,采用外标法测量单培养粗提物和共培养粗提物中化合物的相对含量,实验结果显示:化合物1,3,7和8仅在单培养中产生,化合物2,9,10和12-14在白囊耙齿菌、蜜环菌和天麻共培养粗提物中也存在,化合物14的相对含量最大。由此可见,白囊耙齿菌产生的化合物14抑制与天麻相关的植物病原菌。