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目的：
前期实验研究表明，扶肝化纤汤能够改善肝纤维化大鼠肝功能、明显降低血清肝纤四项并抑制大鼠肝组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)mRNA含量。在前期动物体内实验研究的基础上，本课题从体外实验的角度，运用分子生物学、细胞培养等技术，通过观察扶肝化纤汤含药血清对TGF-β1诱导的肝星状细胞株（hepatic stellate cells，HSC）-T6活化增殖及Smad3、Smad7、α-平滑肌动蛋白(α-smooth museleactin，α-SMA)、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响，来探讨其对TGF-β1/Smad信号通路的调控作用，以进一步深化扶肝化纤汤抗肝纤维化(Hepatic fibrosis，HF)作用机制，进而为临床提供用药基础，并丰富中医“肝病实脾、培土荣木”的科学内涵。
方法：
将40只体重180-200g、雄性Wistar大鼠按随机数字随机分为2组，正常对照组、扶肝化纤汤组（中药组），每组各20只。中药组按体表面积计算灌胃给药，正常对照组予等量生理盐水灌胃，每日一次，连续7d，第7d重复给药2次，间隔时间2h，于末次给药1h后腹主动脉取血，制备扶肝化纤汤含药血清;HSC-T6细胞用含10％胎牛血清的高糖DMEM培养基，在37℃、5％CO2饱和湿度培养箱中培养，待细胞80％～90％融合时传代，MTT法确定给药浓度，按实验具体分组（阻断组中阻断剂为Smad3阻断剂）：空白对照组（A组）、正常组（B组）、中药组（C组）、阻断组1、阻断组2、阻断组3干预HSC-T6后，MTT法测定不同浓度扶肝化纤汤含药血清对HSC-T6增殖的影响;RT-PCR检测各组Smad3、Smad7、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA含量的表达。
结果：
1不同给药浓度对HSC-T6增殖的影响
扶肝化纤汤含药血清给药5％、10％、15％、20％各浓度组均能够抑制HSC-T6增殖，各浓度组与空白对照组、正常组比较有统计学意义(P＜0.01)，阻断组3与空白对照组、阻断组1、阻断组2比较有统计学意义(P＜0.01)。
2各给药组对Smad3、Smad7、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响(1)与空白对照组相比，中药组、阻断组2、阻断组3Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，正常组Smad3mRNA相对表达明显升高(P＜0.01);与阻断组1相比，阻断组2、阻断组3Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，阻断组3与阻断组2相比，具有统计学意义(P＜0.05)。
(2)与空白对照组相比，中药组、阻断组2、阻断组3Smad7mRNA相对表达明显升高(P＜0.01)，正常组Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，与阻断组1相比，阻断组2、阻断组3Smad7mRNA相对表达明显升高(P＜0.01)，阻断组3与阻断组2相比，具有差异(P＜0.05)。
(3)与空白对照组相比，中药组、阻断组2、阻断组3α-SMAmRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，正常组Smad3mRNA相对表达明显升高(P＜0.01);与阻断组1相比，阻断组2、阻断组3Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，阻断组3与阻断组2相比，具有差异(P＜0.05)。
(4)与空白对照组相比，中药组、阻断组2、阻断组3Ⅰ型胶原mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，正常组Smad3mRNA相对表达明显升高(P＜0.01);与阻断组1相比，阻断组2、阻断组3Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，阻断组3与阻断组2相比，具有差异(P＜0.05)。
结论：
1.扶肝化纤汤能够抑制TGF-β1诱导的HSC-T6活化增殖。
2.扶肝化纤汤可抑制Smad3mRNA表达、上调Smad7mRNA表达，证实本方，可通过TGF-β1/Smad信号转导通路发挥抗HF作用。
3.扶肝化纤汤可抑制α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达，证实本方可抑制HSC活化，减少ECM的合成，抑制HF的进展。
4.扶肝化纤汤可能通过TGF-β1/Smad信号转导通路抑制Smad3mRNA表达、上调Smad7mRNA表达，抑制α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达，发挥抗HF作用。
5.基于中医“肝病实脾、培土荣木”理论，扶肝化纤汤可通过健脾疏肝、化瘀消癥、扶正解毒治法治疗HF。
前期实验研究表明，扶肝化纤汤能够改善肝纤维化大鼠肝功能、明显降低血清肝纤四项并抑制大鼠肝组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)mRNA含量。在前期动物体内实验研究的基础上，本课题从体外实验的角度，运用分子生物学、细胞培养等技术，通过观察扶肝化纤汤含药血清对TGF-β1诱导的肝星状细胞株（hepatic stellate cells，HSC）-T6活化增殖及Smad3、Smad7、α-平滑肌动蛋白(α-smooth museleactin，α-SMA)、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响，来探讨其对TGF-β1/Smad信号通路的调控作用，以进一步深化扶肝化纤汤抗肝纤维化(Hepatic fibrosis，HF)作用机制，进而为临床提供用药基础，并丰富中医“肝病实脾、培土荣木”的科学内涵。
方法：
将40只体重180-200g、雄性Wistar大鼠按随机数字随机分为2组，正常对照组、扶肝化纤汤组（中药组），每组各20只。中药组按体表面积计算灌胃给药，正常对照组予等量生理盐水灌胃，每日一次，连续7d，第7d重复给药2次，间隔时间2h，于末次给药1h后腹主动脉取血，制备扶肝化纤汤含药血清;HSC-T6细胞用含10％胎牛血清的高糖DMEM培养基，在37℃、5％CO2饱和湿度培养箱中培养，待细胞80％～90％融合时传代，MTT法确定给药浓度，按实验具体分组（阻断组中阻断剂为Smad3阻断剂）：空白对照组（A组）、正常组（B组）、中药组（C组）、阻断组1、阻断组2、阻断组3干预HSC-T6后，MTT法测定不同浓度扶肝化纤汤含药血清对HSC-T6增殖的影响;RT-PCR检测各组Smad3、Smad7、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA含量的表达。
结果：
1不同给药浓度对HSC-T6增殖的影响
扶肝化纤汤含药血清给药5％、10％、15％、20％各浓度组均能够抑制HSC-T6增殖，各浓度组与空白对照组、正常组比较有统计学意义(P＜0.01)，阻断组3与空白对照组、阻断组1、阻断组2比较有统计学意义(P＜0.01)。
2各给药组对Smad3、Smad7、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响(1)与空白对照组相比，中药组、阻断组2、阻断组3Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，正常组Smad3mRNA相对表达明显升高(P＜0.01);与阻断组1相比，阻断组2、阻断组3Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，阻断组3与阻断组2相比，具有统计学意义(P＜0.05)。
(2)与空白对照组相比，中药组、阻断组2、阻断组3Smad7mRNA相对表达明显升高(P＜0.01)，正常组Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，与阻断组1相比，阻断组2、阻断组3Smad7mRNA相对表达明显升高(P＜0.01)，阻断组3与阻断组2相比，具有差异(P＜0.05)。
(3)与空白对照组相比，中药组、阻断组2、阻断组3α-SMAmRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，正常组Smad3mRNA相对表达明显升高(P＜0.01);与阻断组1相比，阻断组2、阻断组3Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，阻断组3与阻断组2相比，具有差异(P＜0.05)。
(4)与空白对照组相比，中药组、阻断组2、阻断组3Ⅰ型胶原mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，正常组Smad3mRNA相对表达明显升高(P＜0.01);与阻断组1相比，阻断组2、阻断组3Smad3mRNA相对表达明显降低(P＜0.01)，阻断组3与阻断组2相比，具有差异(P＜0.05)。
结论：
1.扶肝化纤汤能够抑制TGF-β1诱导的HSC-T6活化增殖。
2.扶肝化纤汤可抑制Smad3mRNA表达、上调Smad7mRNA表达，证实本方，可通过TGF-β1/Smad信号转导通路发挥抗HF作用。
3.扶肝化纤汤可抑制α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达，证实本方可抑制HSC活化，减少ECM的合成，抑制HF的进展。
4.扶肝化纤汤可能通过TGF-β1/Smad信号转导通路抑制Smad3mRNA表达、上调Smad7mRNA表达，抑制α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达，发挥抗HF作用。
5.基于中医“肝病实脾、培土荣木”理论，扶肝化纤汤可通过健脾疏肝、化瘀消癥、扶正解毒治法治疗HF。