稻瘟病是全世界水稻生产上的重要真菌病害,稻谷年损失达到数亿公顷,严重影响世界粮食安全。因此,加强对稻瘟病菌的研究以及控制其病害流行具有重要的意义。稻瘟病由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)侵染水稻发病引起,目前防治稻瘟病主要采取的方式是选育抗病品种,但由于该病原菌在自然界群体多样且易变,新的致病型不断产生,常常导致刚选育出来的抗病品种不能抵抗新的稻瘟病菌致病型的侵染,或者在种植几年后就失去利用价值。目前虽然也有不断对致病型变异的可能途径找出原因,但是要从根本上防治稻瘟病,还是要从稻瘟病菌的生长发育及其致病分子机制方面做研究。近年来,随着稻瘟病菌全基因组序列的公布和遗传转化操作技术的成熟,使得我们在相关的致病基因生长发育和致病机理方面的研究步伐加快,也为找到稻瘟病菌杀菌剂的新靶靶标提供了理论和技术支持。细胞内物质转运对细胞的生存和生长至关重要,它能促进细胞膜、溶酶体等形成,使细胞能够分泌蛋白质、激素和神经递质并通过胞吞作用摄取外源分子。胞吞作用是普遍存在于酵母及哺乳动物中的一个复杂的质膜运输过程,其包括各种蛋白质及脂质激酶,磷酸(脂)酶、信号分子的吸收和肌动蛋白骨架的排列。在此过程中,质膜蛋白、脂质及一些大分子物质通过胞内的囊泡运输被分配到早期的内含体中,随之在成熟的内含体及液泡中降解,或者作为一种蛋白受体在循坏中被重新利用。囊泡转运受多种调节分子控制,其中就有ADP核糖基化因子(ADP-ribosylation factor,ARF),它是Ras超家族成员。同时ARF还参与调节磷脂酶D的活性,在细胞内物质运输和信号转导过程中具有更加重要的生理功能。一般情况下,ARF是由一个鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)激活,与其结合的GDP转化为GTP,激活的GTP酶蛋白与SNARE和运输物质结合形成复合体,向囊泡运输途径中的下一个部位转移。这个复合体被GTP酶的另一个效应分子GTP酶激活蛋白(GAP)所稳定,当这种复合体达到一定数量后,相关的器膜变形,囊泡形成才会启动,最后使ARF又回到细胞质中。因此,GAP蛋白在囊泡运输中具有重要作用。本文的研究对象MoGlo3、MoGcsl,是一类GAP蛋白,本实验对这两个GAP蛋白在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能进行分析。结果表明敲除突变体△Moglo3影响稻瘟病菌的生长发育,影响对水稻,大麦的致病性,而△Mogcs1不影响对水稻、大麦的致病性。突变体菌株△Mglo3较野生型菌株营养菌丝生长减慢,不产生分生孢子,侵染菌丝减少且生长减慢,对不同的胁迫表现出敏感性,AMogcs1产孢量降低,附着胞形成加快。上述实验结果表明,MoGlo3参与调控稻瘟病菌的生长发育及致病过程。SNARE蛋白自发现以来,就一直是一种能够主导膜泡融合的中心成分。我们对稻瘟病菌的一个SNARE蛋白MoSyn8进行了定位分析,发现突变体不能形成Actin环。