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目的:探讨在胰腺癌细胞中,miRNA-200c(miR-200c)对AHNAK基因的表达及细胞侵袭能力的影响。方法:在胰腺癌细胞SW1990和PANC-1中,转染miR-200c类似物(miR-200c mimics)及其阴性对照(Scramble)24小时后,利用实时定量PCR检测miR-200c是否过表达成功;采用Transwell侵袭实验,来检测miR-200c过表达后SW1990和PANC-1细胞侵袭力的变化;采用TargetScan、PicTar和miranda数据库预测miR-200c的靶基因。使用miranda数据库预测靶基因AHNAK的3’非翻译区(3’UTR)与miR-200c的结合位点;构建靶基因AHNAK的3’UTR(野生型3’UTR)与miR-200c的结合位点突变的序列(突变型3’UTR)。在SW1990及PANC-1细胞中,按照上述分组进行转染实验,按照Dual-luciferase试剂盒说明书检测萤火虫和海肾荧光素酶活性的变化,验证miR-200c与AHNAK的3’非翻译区(3’UTR)的结合能力;并用蛋白免疫印迹(Western Blotting)实验检测SW1990及PANC-1细胞中miR-200c过表达对AHNAK蛋白表达的作用。结果:在SW1990与PANC-1细胞中,相比转染阴性对照Scramble组,转染miR-200c mimics 24小时后,miR-200c的表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组(Scramble)相比,人胰腺癌细胞株SW1990及PANC-1过表达miR-200c后,SW1990与PANC-1细胞的侵袭能力显著减弱。生物信息学结果显示,miR-200c可特异结合AHNAK 3’UTR区域。构建靶基因AHNAK的3’UTR(野生型3’UTR)与miR-200c的结合位点突变的序列(突变型3’UTR)。在SW1990及PANC-1细胞中,按照上述分组进行转染实验。按照Dual-luciferase试剂盒说明书检测萤火虫和海肾荧光素酶活性。海肾萤光素酶活性作为内参对照。我们的实验结果显示,与Scramble和pmirGLOAHNAK-wt共转染相比,miR-200c mimics和pmirGLO-AHNAK-wt共转染至SW 1990和PANC-1细胞,荧光素酶活性显著降低。但是,与Scramble和pmirGLO-AHNAKmut共转染相比,miR-200c mimics和pmirGLO-AHNAK-mut共转染至SW1990和PANC-1细胞,荧光素酶活性基本不变。上述结果表明,miR-200c能够与AHNAK基因的3’UTR结合。在人胰腺癌细胞SW1990和PANC-1中,与对照Scramble相比,过表达miR-200c能够显著抑制AHNAK的蛋白表达。结论:miR-200c可能通过靶向调节AHNAK基因,从而发挥抑制胰腺癌细胞侵袭的作用。