白斑综合症病毒(WSSV)检测技术及应用研究--PCR和核酸探针原位杂交

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该文以患有白斑综合症的濒死的斑节对虾为材料,纯化了WSSV.在纯化病毒的基础上,建立了WSSV部分基因组文库.从WSSV部分基因文库中,得到核酸探针,从而建立了原位杂交检测方法.原位杂交用于WSSV检测,比组织切片HE染色更准确更直观.原位杂交检测了人工感染的日本对虾、脊尾白虾,结果均为阳性,说明它们是WSSV宿主.斑节对虾的亲虾的卵中WSSV为阳性,说明亲虾可以带毒.改进了WSSV PCR检测方法.检测人工感染的斑节对虾,发现注射感染比股喂感染阳性结果出现得早.附肢、肌肉在注射感染2h后,套式PCR为阳性,说明这两个部位病毒增殖较快.用原位杂交和PCR方法检测了病虾的复眼.复眼的神经胶质细胞WSSV为阳性,PCR结果也是阳性,表明复眼是WSSV的侵染器官,其所含色素不影响核酸探针原位杂交和PCR扩增.
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