番茄晚疫病菌交配型与基因型鉴定及其分析

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番茄晚疫病是一种由致病疫霉[Phytophthora infestans (Mont.) De Bary]引起的世界范围和毁灭性的植物病害。致病疫霉群体的遗传结构组成与变化直接影响着病害的发生与流行,二者有着密切的关系。自上世纪80年代晚疫病在全球番茄主产国家再度爆发性流行之后,世界各国纷纷致力于致病疫霉群体的表型与基因型的鉴定与研究。有的国家已经建立了一套完整的技术体系,并且取得了比较系统的研究成果。江苏省地处长江三角洲地区,是我国番茄主产区之一。由于地理上的交联性,气候上的过渡性以及生产方式的多样性,致病疫霉种群可能复杂多样,这必将引起番茄晚疫病的危害更为严重,给番茄生产带来严峻的考验。因此,迫切需要开展与之相关的研究。本实验通过从江苏省及其周边地区的番茄主产区进行广泛采样,成功分离到晚疫病菌菌株,并进行了相关的表型与基因型的鉴定与分析,初步明确了上述地区晚疫病菌的遗传组成与分布以及主流的病原菌群体,为研制高效、低毒、环保型的抗真菌试剂、选育抗晚疫病的番茄品种奠定了基础。主要研究结果如下:(1)用选择性培养基,选择刚发病的症状典型的病叶与颈部进行分离,采用病组织分离法得到分离物,病原菌采用单孢法进行纯化,通过回接测定分离物的致病性。最终成功分离到番茄晚疫病菌菌株91个。(2)对91个番茄晚疫病菌菌株进行了交配型鉴定,全部是A1交配型;没有发现A2交配型菌株。初步判断江苏及其周边地区番茄主产区的晚疫病菌在自然条件下没有发生有性生殖。(3)对91个番茄晚疫病菌菌株的mtDNA单倍型进行鉴定,结果显示:mtDNA单倍型存在Ib和IIb两种类型。其中IIb类型的菌株86个,占全部菌株的94.5%,在所有的病样采集区均有发现,为样本采集区优势的mtDNA单倍型类型;Ib类型仅在江苏徐州与安徽和县的病样采集区有发现,且数量不多。总体上,上述地区番茄晚疫病菌以“新”群体为主。(4)对91个番茄晚疫病菌菌株的6-磷酸葡萄糖异构酶(Gpi)和肽酶(Pep)进行了基因型鉴定与分析。结果显示有4种Gpi类型:100/100/111、86/100/111、86/100和100/100;2种Pep类型:100/100和92/100。共6种同工酶基因型类型: Gpi(100/100)/Pep(92/100)、Gpi(100/100/111)/Pep(100/100)、Gpi(86/100/111)/Pep(100/100)、Gpi(86/100)/Pep(92/100)、Gpi(100/100)/ Pep(100/100)、Gpi(100/100/111)/Pep(92/100)。其中Gpi(100/100/111)/ Pep(100/100)类型的晚疫病菌在病样采集区分布最广、数量最多,为病样采集区优势的病原菌群体。其它5种类型不同地区之间差异明显。江苏徐州情况最为复杂,其次是安徽和县与山东青岛;宿迁、南京、镇江、扬州与南通等地区的番茄晚疫病菌同工酶基因型相对简单。总体上,病样采集区晚疫病菌群体的同工酶基因型相对比较复杂,群体的多样性水平比较高。
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