大豆抗病毒基因GmNH23的筛选鉴定及功能分析

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yu8937
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大豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus, SMV)是一种在全球传播范围较广的病毒。目前大豆的一些SMV抗性相关的遗传连锁标记(QTL)在染色体上已经定位,但是具体的抗性基因(resistance gene, R)仍未被发现。在烟草中已经发现了抗TMV的N蛋白,N蛋白属于NBS-LRR家族蛋白。我们在大豆基因组上发现了35个N基因的同源基因,将其命名为GmNH (Glycine max N-Homolog)基因。当抗病基因过表达时,会与病原相互作用产生植物细胞程序性死亡的超敏反应(Hypersensitive Response,HR)。本次实验中利用这种超敏反应对23个GmNH基因的SMV抗性进行了筛选鉴定。同时因为(GmNH基因是N基因的同源基因,所以检测了GmNH基因对TMV的抗性。结果表明,在大豆N-homolog基因中只有GmNH23对SMV和TMV均具有抗性,而其余的N-homolog基因对这两种病毒都没有抗性。另外,我们发现GmNH23为大豆miR-2和miR-9的靶标基因,然后我们通过RLM-RACE和Dual-luciferase assay验证了miR2/9对GmNH23的调控作用。SMV成功侵染时miR2/9的水平上调,而其靶标GmNH23的表达量下调。综上所述,GmNH23为一个编码NBS-LRR蛋白的抗病毒基因,其表达受miR2/9的调控。SMV通过诱导miR2/9来抑制GmNH23的表达,最终达到成功侵染和扩增。我们的结果揭示了miR2/9-GmNH23的调控关系及其在SMV侵染中的作用,为进一步阐明SMV-大豆互作的分子机制打下了基础。
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