论文部分内容阅读
目的 1．观察大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中CD11a及髓过氧化酶(MPO)和肾功能的变化，探讨淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)在肾脏IRI中的作用。 2．观察不同损伤程度的肾组织中的CD11a表达水平和肾功能变化情况，以及肾脏的组织病理学改变，探讨LFA-1在移植肾急性排斥反应(AR)中的作用。 方法 1．健康雄性SD大鼠45只，随机分为9组，每组5只。具体分组如下：假手术对照组、缺血30min再灌注组和缺血60min再灌注组，按不同再灌注时间将两个缺血再灌注组又分为单纯缺血组、再灌注24h组、再灌注48h组和再灌注72h组。各组均在钳夹左肾蒂后立即切除右肾，并分别于各时间点由原切口进入腹腔，迅速取出左肾；假手术对照组游离左肾蒂后切除右肾，但并不钳夹左肾蒂。 2．将大鼠左肾取出后，正中纵行剖开，一半肾组织迅速投入液氮中速冻备用，一半肾组织置于10％甲醛溶液固定备用。冰冻标本用于检测CD11a的表达和MPO的活性，肾组织CD11a表达的检测采用免疫组化链霉亲和素—生物素技术(Labelled streptavidin blotin method，LSAB)法；肾组织MPO活性采用酶学分光光度法测定。甲醛固定的标本制成蜡块经苏木精伊红(HE)染色后进行组织病理学观察。在取出左肾后立即取其腔静脉血，然后放血处死大鼠。静脉血经离心分离血清后使用OLYMPUS AU-300全自动生化分析仪测定血清尿素氮(BUN) 第。军 医 上 舍 硕 士 舍 伍H丈 和肌研（Cr）的水平。 结果 l．正常’肾组织中CDlla的表达极低，但是在缺血后即开始表达，再 灌注后各组表达均显著高于对照组，P＜0．of。缺血60Inin再灌注0、 24、48h组的CDlla的表达显著高于同一时间点缺血30Inin组，P＜0．of。 2．正常肾组织和单纯缺血组中MPO活性极低，再灌注后各组MPO 活性均显著高于对照组，P＜0．of。缺血60Inin再灌注后各组与同一时 间点缺血30Inin组比较MP O均显著升高，P＜0刀1。 3．大鼠肾功能单纯缺血组与假手术对照组相比无显著差异，再灌注后 各组大鼠血清 BUN和 Cr均显著高于对照组，P＜0．of。缺血 60ruin再 灌注后各组与同一时间点缺血30Inin组比较大鼠血清BUN和Cr均显 著升高，P＜0．of。 4．大鼠肾脏组织病理学改变：单纯缺血组的肾组织病理损伤最重，随 着再灌注时间的延长而逐渐减轻，而且同一时间点缺血60Inin组的病 理损伤明显重于缺血30min组。 结论 1．大鼠肾l过程中肾组织的CDlla和MPO水平明显增高，CDlla 与CD18共同构成LFAI，因此可以认为LFA－l介导的白细胞粘附在 肾IRI中起重要作用。 2．M后肾组织中CDlla ＄jk的明显上调，进一步阐明了g与AR 的联系机制，LFA－l也是引起移植肾AR的一个重要机制。 3．大鼠肾脏缺血时间越长，CDlla的表达也越高。说明移植肾缺血时 间越长，发生急性排斥反应的可能性越大。