论文部分内容阅读
目的 1.观察大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中CD11a及髓过氧化酶(MPO)和肾功能的变化,探讨淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)在肾脏IRI中的作用。 2.观察不同损伤程度的肾组织中的CD11a表达水平和肾功能变化情况,以及肾脏的组织病理学改变,探讨LFA-1在移植肾急性排斥反应(AR)中的作用。 方法 1.健康雄性SD大鼠45只,随机分为9组,每组5只。具体分组如下:假手术对照组、缺血30min再灌注组和缺血60min再灌注组,按不同再灌注时间将两个缺血再灌注组又分为单纯缺血组、再灌注24h组、再灌注48h组和再灌注72h组。各组均在钳夹左肾蒂后立即切除右肾,并分别于各时间点由原切口进入腹腔,迅速取出左肾;假手术对照组游离左肾蒂后切除右肾,但并不钳夹左肾蒂。 2.将大鼠左肾取出后,正中纵行剖开,一半肾组织迅速投入液氮中速冻备用,一半肾组织置于10%甲醛溶液固定备用。冰冻标本用于检测CD11a的表达和MPO的活性,肾组织CD11a表达的检测采用免疫组化链霉亲和素—生物素技术(Labelled streptavidin blotin method,LSAB)法;肾组织MPO活性采用酶学分光光度法测定。甲醛固定的标本制成蜡块经苏木精伊红(HE)染色后进行组织病理学观察。在取出左肾后立即取其腔静脉血,然后放血处死大鼠。静脉血经离心分离血清后使用OLYMPUS AU-300全自动生化分析仪测定血清尿素氮(BUN) 第。军 医 上 舍 硕 士 舍 伍H丈 和肌研(Cr)的水平。 结果 l.正常’肾组织中CDlla的表达极低,但是在缺血后即开始表达,再 灌注后各组表达均显著高于对照组,P<0.of。缺血60Inin再灌注0、 24、48h组的CDlla的表达显著高于同一时间点缺血30Inin组,P<0.of。 2.正常肾组织和单纯缺血组中MPO活性极低,再灌注后各组MPO 活性均显著高于对照组,P<0.of。缺血60Inin再灌注后各组与同一时 间点缺血30Inin组比较MP O均显著升高,P<0刀1。 3.大鼠肾功能单纯缺血组与假手术对照组相比无显著差异,再灌注后 各组大鼠血清 BUN和 Cr均显著高于对照组,P<0.of。缺血 60ruin再 灌注后各组与同一时间点缺血30Inin组比较大鼠血清BUN和Cr均显 著升高,P<0.of。 4.大鼠肾脏组织病理学改变:单纯缺血组的肾组织病理损伤最重,随 着再灌注时间的延长而逐渐减轻,而且同一时间点缺血60Inin组的病 理损伤明显重于缺血30min组。 结论 1.大鼠肾l过程中肾组织的CDlla和MPO水平明显增高,CDlla 与CD18共同构成LFAI,因此可以认为LFA-l介导的白细胞粘附在 肾IRI中起重要作用。 2.M后肾组织中CDlla $jk的明显上调,进一步阐明了g与AR 的联系机制,LFA-l也是引起移植肾AR的一个重要机制。 3.大鼠肾脏缺血时间越长,CDlla的表达也越高。说明移植肾缺血时 间越长,发生急性排斥反应的可能性越大。