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飞机草(Eupatorium odoratum L.)是于1934年首次出现在我国云南的外来入侵植物,现已被列为世界上危害严重的100种外来入侵物种之一。防控飞机草进一步蔓延的入侵机理研究中较有代表性的假说为冯玉龙提出的“氮分配进化假说”,本试验以入侵植物飞机草的原产地种墨西哥生态型和入侵地种西双版纳生态型作为试材,设定3种氮素水平:高氮(氮含量315.165mg/L)、正常氮(氮含量210.11mg/L)和低氮(氮含量105.055mg/L),针对假说提出的氮素与植物入侵的关系展开研究。4-香豆酸:辅酶A连接酶(4-coumarate:coenzyme A ligase,4CL)是连接苯丙烷代谢途径和木质素、类黄酮等物质特异合成途径中的关键酶。本试验通过对此关键酶-4CL在不同氮素水平下的酶活性、基因表达研究将飞机草苯丙氨酸代谢途径与氮素水平联系起来,以期揭示苯丙烷代谢途径在植物入侵中的作用,从而进一步获取飞机草入侵进化响应的证据。本研究已取得以下成果:(1)不同氮素水平下4CL酶活性及相关指标变化:与正常氮素水平相比,低氮素水平下飞机草4CL酶活性较低,但其生长速率较高,由此可能造成木质素含量低,对外界环境的抵御能力减弱。同时茎和叶的叶绿素含量较低,会造成植株光合能力的减弱。与正常氮素水平相比,高氮素水平下飞机草4CL酶活性较高,茎中的酶活性高于叶,可能由于其生长速率低,茎中木质素合成量高于叶中所致;而叶中的叶绿素含量高于茎,推测其大部分养料供给了叶的生长,氮素更多的向光合机构分配,以减少其向防御系统中的分配比例,扩大飞机草的入侵能力;(2)飞机草两种生态型比较:从形态观察入侵地种西双版纳生态型生长状况优于原产地种墨西哥生态型,并且生长速率较高。在不同氮素水平下西双版纳生态型的4CL酶活性、酶比活力始终高于墨西哥生态型;(3)获得飞机草4CL基因部分序列:迄今飞机草4CL基因尚未被克隆,本试验结合简并引物设计和RT-PCR方法从飞机草中获得编码4CL基因保守区的DNA序列,命名为Eo4CL。该序列全长426bp,编码142个氨基酸。序列分析表明:Eo4CL基因编码的蛋白含4CL类蛋白特异的催化活化中心GEICIRG。同时该基因编码的蛋白与其他植物4CL蛋白序列有一定的相似性;(4)获得飞机草β-Actin基因部分序列:利用GenBank中公布的菊科植物β-Actin基因序列设计引物,PCR扩增获得内参基因β-Actin序列;(5)氮素水平对Eo4CL基因表达的影响:飞机草茎中Eo4CL基因的表达量均大于叶片,不同氮素水平间关系为:高氮>对照>低氮。