谷子转录因子基因SiNAC45与SiMYB9的克隆及功能验证

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NAC(nascent polypeptide-associated complex)和MYB转录因子在植物生长发育和非生物胁迫响应等过程中发挥重要的调控作用。谷子具有抗旱、耐瘠薄的特点,是作物抗逆研究的理想材料。本研究从前期对低钾胁迫的转录组测序结果中筛选到两个在低钾胁迫下表达量上调的NAC家族转录因子基因SiNAC45和MYB家族转录因子SiMYB9,并进行特性分析及抗性鉴定,得到以下研究结果:1.SiNAC45属于NAC基因家族的第一亚族。该基因序列全长1383bp,有三个外显子。该基因编码461个氨基酸,分子量为50.7kD,等电点为6.92。SiNAC45在20-100个氨基酸之间有一段NAM保守结构域;谷子SiMYB9属于R2R3MYB家族的转录因子基因,基因全长948bp,有两个外显子和三个内含子,编码316个氨基酸。2.基因表达模式分析结果表明,SiNAC45位于细胞核,主要在谷子根部表达,并且能够被低钾和ABA诱导表达,而干旱、盐的胁迫不能诱导表达,种子萌发期SiNAC45基因能够负调ABA信号;SiMYB9位于细胞核,能够被低氮、低磷、低钾诱导表达,在ABA、盐、干旱处理不能诱导该基因表达。3.基因抗性分析结果显示,在不同浓度低钾处理下,SiNAC45过表达拟南芥的根长和植株鲜重明显高于受体对照;不同低氮、低磷、低钾处理下,SiMYB过表达拟南芥的根长大于受体对照,植株鲜重和侧根数量没有明显差异。4.SiNAC45过表达植株中两种重要的钾离子转运体基因AKT1及和HAK1的表达显著提高;SiMYB9过表达植株中与钾吸收相关的CBL9和CIPK23的表达量明显提高。综上,SiNAC45基因过表达后显著提高植株的对低钾的抗性,并且能够负调ABA信号。SiMYB9基因过表达后能够提高植株对低氮、低磷、低钾的抗性。SiNAC45和SiMYB9的特性分析及功能鉴定为进一步揭示谷子抗逆分子机制打下了基础,并为作物的遗传改良提供了新的基因。
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