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本试验研究米曲霉和酿酒酵母对奶牛瘤胃物质发酵及相关血液生化指标的影响。首先采用体外培养法筛选米曲霉和酿酒酵母单独添加量及其混合使用的适宜比例和水平;然后利用装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛,采用3×3拉丁方试验设计,对米曲霉和酿酒酵母体外初步筛选的结果进行饲养试验研究,通过其对瘤胃内环境和发酵产物、日粮营养物质降解率、日粮表观消化率、瘤胃纤维素酶活性及相关血液生化指标综合影响效果,探讨米曲霉和酿酒酵母对奶牛的营养价值,为应用米曲霉和酿酒酵母提高奶牛日粮能量水平及生产性能提供参考依据。1.米曲霉和酿酒酵母及其混合使用适宜添加水平的体外筛选试验(1)米曲霉和酿酒酵母单独添加试验采用单因素对照试验设计,米曲霉添加量设为0、0.02%、0.04%、0.06%、0.08%、0.1%DM6个梯度,酿酒酵母添加量设为0、0.17%、0.33%、0.50%、0.67%、0.83%DM6个梯度,每个水平设3个重复,进行0、6h、12h、24h体外批次培养。利用多项指标综合指数对培养液pH值、NH3-N浓度和DM、NDF、ADF消失率进行综合评定,筛选出适宜添加量分别为米曲霉0.04%DM和0.08%DM;酿酒酵母0.33%DM和0.67%DM。(2)米曲霉和酿酒酵母混合比例的筛选采用L4(23)正交试验设计:将上述米曲霉和酿酒酵母单独添加初步筛选水平进行4组正交组合然后进行体外培养。筛选出米曲霉:酿酒酵母的适宜比例为:4:67。(3)米曲霉和酿酒酵母混合添加水平的筛选试验设计同(1)。米曲霉和酿酒酵母混合添加量为0、0.15%、0.3%、0.45%、0.6%、0.75%DM6个梯度,每个水平设3个重复。筛选出米曲霉和酿酒酵母混合添加的适宜水平为0.3%DM和0.6%DM。2.米曲霉和酿酒酵母对奶牛瘤胃物质发酵及相关血液生化指标的影响奶牛饲养试验采用3×3拉丁方试验设计。米曲霉添加水平分别为0、0.04%和0.08%DM;酿酒酵母添加水平分别为0、0.33%DM和0.67%DM;米曲霉和酿酒酵母混合添加水平分别为0、0.3%和0.6%DM。研究米曲霉和酿酒酵母对瘤胃内环境和发酵产物、日粮营养物质降解率、日粮表观消化率、瘤胃纤维素酶活性及相关血液生化指标的影响。(1)米曲霉和酿酒酵母单独添加及混合添加对奶牛瘤胃液pH值无明显影响。米曲霉和酿酒酵母单独添加有降低瘤胃液NH3-N浓度趋势,但差异均不显著(P>0.05),0.3%DM二者混合物显著降低了瘤胃液NH3-N浓度(P<0.05)。添加0.04%DM米曲霉的瘤胃液乙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸浓度均显著高于未添加组(P<0.05);酿酒酵母各添加组的瘤胃乙酸和总挥发性脂肪酸浓度及乙酸与丙酸比值均显著高于未添加组(P<0.05);0.3%DM二者混合物的瘤胃乙酸和总挥发性脂肪酸浓度均显著高于未添加组(P<0.05)。(2)米曲霉和酿酒酵母单独添加及混合添加均显著提高了日粮营养物质在瘤胃中的降解率(P<0.05)。0.04%DM米曲霉显著提高了CP和NDF消化率(P<0.05),并也有提高其他营养物质的消化率趋势。0.33%DM酿酒酵母显著提高了CP消化率(P<0.05),并也有提高其他营养物质的消化率趋势。0.3%DM二者混合物显著提高了CP消化率(P<0.05),并也有提高ADF消化率的趋势,米曲霉和酿酒酵母混合各添加组有提高DM和NDF消化率趋势,但差异均不显著(P>0.05)。(3)米曲霉和酿酒酵母单独添加及0.3%DM的二者混合物使用均显著提高了瘤胃纤维素酶活性(P<0.05),其中以0.04%DM米曲霉和0.33%DM酿酒酵母效果最好。(4)米曲霉和酿酒酵母单独添加及混合添加均有增加血钙、血磷和血清尿素氮含量的趋势,但差异均不显著(P>0.05)。单独添加米曲霉显著提高了血清碱性磷酸酶活性(P<0.05),单独添加酿酒酵母及二者混合物对血清碱性磷酸酶活性的影响差异均不显著(P>0.05)。米曲霉和酿酒酵母单独添加对血清葡萄糖含量的影响差异均不显著(P>0.05),而添加0.3%DM二者混合物显著提高了血清葡萄糖含量(P<0.05)。米曲霉和酿酒酵母及混合添加均显著增加了血清总蛋白含量(P<0.05)。