mda-7/IL24基因对鼻咽癌CNE细胞生长抑制及凋亡的实验研究

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鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)是头颈部常见的恶性肿瘤,由于其局部复发和远处转移而极易导致治疗失败,寻找有效的耐受性好的化疗药物以及放化疗的结合方式是近年来的研究热点。黑色素瘤分化相关基因7(mda-7)是一种抑癌基因,已经证实mda-7可以抑制除小细胞肺癌/胰腺癌以外的其它肿瘤包括恶性黑色素瘤、乳腺癌、肝癌、前列腺癌、卵巢癌等实体瘤细胞的生长并诱导其凋亡。但对于鼻咽癌尚无文相关文献报道。基于上述背景,我们将首先生产免疫缺陷的腺病毒载体搭载的基因,然后将其感染鼻咽癌CNE细胞,观察肿瘤细胞生长情况,对肿瘤细胞的增殖与凋亡进行检测。目的:探讨mda-7/IL-24对鼻咽癌细胞是否具有凋亡诱导效果,进而对细胞内抗凋亡分子与促凋亡分子进行进一步检测,确定其引起凋亡的主要途径;同时,采用mda-7/IL-24与化疗药物共同诱导肿瘤细胞凋亡,确定mda-7/IL-24作为化疗药的辅助治疗手段在临床鼻咽癌治疗中的有效性。材料和方法:将搭载mda-7/IL-24基因的腺病毒感染鼻咽癌细胞系CNE,采用PI染色、流式细胞术等对肿瘤细胞生长存活情况进行分析,包括生长曲线的测定,细胞增殖检测,细胞凋亡分析;RT-PCR检测抗凋亡蛋白Bcl-2, Bcl-xl的表达情况;同时采用搭载mda-7/IL-24基因的腺病毒与化疗药物阿糖胞苷协同给药,观察肿瘤细胞的凋亡情况。结果:搭载mda-7/IL-24基因的腺病毒可以有效抑制鼻咽癌细胞系CNE的增殖、并诱导其凋亡与坏死;抗凋亡蛋白Bcl-2, Bcl-xl的表达下调;搭载mda-7/IL-24基因的腺病毒与化疗药物阿糖胞苷协同给药,鼻咽癌细胞系CNE细胞发生显著凋亡。结论:搭载mda-7/IL-24基因的腺病毒对鼻咽癌细胞系CNE有明显的抑制增殖、诱导凋亡与坏死作用,抗凋亡蛋白Bcl-2, Bcl-xl的表达下调可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制,与抗肿瘤药物阿糖胞苷协同作用可诱导肿瘤细胞显著凋亡,为将搭载mda-7/IL-24基因的腺病毒作为临床治疗鼻咽癌的手段提供了一定理论依据。
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