重组CHO细胞乙肝疫苗生产中工艺改进的实验研究

来源 :武汉生物制品研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaobu000
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目的:在CHO-C28细胞培养过程中,提高细胞分泌重组HBsAg蛋白的滴度并延长其稳定表达的时间。 方法:在其它培养条件不变的情况下,分别采用含5%、3%、2%和1%浓度的小牛血清的DMEM维持液,来培养CHO细胞,观察细胞的生长繁殖状况及形态,并定期检测收获液中氨、乳酸、残余的葡萄糖浓度,HBsAg蛋白的滴度以及溶液的pH值。通过比较分析,优化最佳的血清浓度。 结果:四组中细胞分泌重组HBsAg蛋白的滴度最高并维持时间最长的是含3%浓度血清的培养液。 结论:优化了CHO-C28细胞培养的条件。   目的:配制浓缩DMEM培养液,防止培养液污染、节省培养液存放空间及使用方便。 方法:改变目前在重组CHO乙肝疫苗大规模生产中所使用的细胞DMEM培养液配制方式,按5倍、10倍两种方式先配制浓缩DMEM,观察培养液中营养成分等物质的溶解情况。在放置一段时间后,稀释成应用液,进行细胞培养,并观察细胞形态,生长状态等,并检测细胞分泌HBsAg蛋白的滴度。 结果:配制5倍浓缩培养液,可以达到目的,稀释成应用液后,在使用过程中,CHO细胞生长良好,分泌HBsAg正常。 结论:在生产中可以推广使用。   
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