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重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）作为常见的重症疾病，病死率非常高，死亡主要的原因是细胞因子（如TNF-α）的激活、免疫功能的紊乱以及炎症介质的释放。因血流动力学和解剖的关系，肝脏成为SAP最早累及的胰外器官之一，其并发肝损伤的机率可高达88.9%[1]，其机制主要是失控性炎症反应及机体免疫功能紊乱。而NF-κB在上述病变的发生过程中起着"信使"作用。作为重要的转录因子,NF-κB参与免疫反应和淋巴细胞分化,其活化可能调控着SAP的启动。NF-κB信号通路对Foxp3表达的调控起着非常关键的作用，当NF-κB被激活或信号强度增强时可直接促进Foxp3的表达和Treg细胞的增加，从而分泌大量的抑制性细胞因子来调节免疫功能的紊乱。SAP肝损伤重要的发病机制之一为肠源性内毒素血症，祖国医学认为内毒素血症在病机上为邪实正虚，所以治疗应是祛邪与扶正的有机结合[2]。连翘具有抗内毒素、抗炎，又有其显著的增强机体免疫和解毒系统对内毒素予以解毒的功效[3]。且目前尚未见在SAP肝损伤中应用的报告。本实验拟探讨核因子(NF)-κB和Foxp3在重症急性胰腺炎（SAP）肝损伤中的作用机制及连翘对其表达活性和SAP肝损伤保护的影响。研究目的探讨核因子(NF)-κB和CD4~+CD25~+调节性T细胞（Treg）在重症急性胰腺炎（SAP）肝损伤中的作用及其可能的机制。实验方法雄性Wistar大鼠48只，随机分成假手术组（SO组）（n=24）和模型组（SAP组）（n=24）。SO组仅翻动胰腺，不注射牛黄胆酸钠（NaTc），SAP组逆行性胰胆管注射牛磺胆酸钠溶液（0.1ml/100g），SO组和SAP组均于术后3h、6h、12h在麻醉下处死大鼠，无菌操作法分别留取腹主动脉血、胰腺、肝脏的标本待测。生化仪测各组血淀粉酶（AMY）及谷丙转氨酶（ALT）水平，放射免疫法测血浆肿瘤坏死因子（TNF-α），鲎试剂法测血浆内毒素含量，流式细胞术测外周血Treg百分数，对胰腺及肝脏进行病理学检查及评分，RT-PCR法检测肝脏组织中NF-κBmRNA和Foxp3mRNA表达量,并对上述所有指标统计后进行分析。主要结果与SO组比较，SAP组中各项指标均随时间升高，并于12h达高峰，外周血中的Treg百分数与血浆中的AMY、ALT及TNF-α的含量均随时间明显升高，SAP组的肝脏、胰腺有明显的病理性改变，各时间点胰腺、肝脏病理学评分均显著高于SO组（P<0.01）。此外肝脏组织NF-κBmRNA的增高导致了Foxp3mRNA和外周血Treg表达明显升高，呈时间依赖性和动态性，（p<0.01），NF-κBmRNA的表达与Treg呈正相关（r=0.738，p<0.01）。主要结论SAP可引起肝损伤，NF-κB高水平激活和Treg大量增多参与SAP肝损伤的发生。研究目的研究各个浓度的连翘水煎液对SAP大鼠肝损伤12h后的肝脏组织中NF-κB和Foxp3水平表达的影响，探讨在用连翘干预后对SAP肝损伤大鼠中的NF-κB作用及免疫调节作用以及两者之间的可能机制。实验方法雄性Wistar大鼠48只，随机分成假手术组（SO组）（n=8）、SAP组（n=8）和干预组（n=32），其中干预组分连翘高（AFS1组）、中（AFS2组）、低（AFS3组）剂量组和阳性对照组(PDTC组)。连翘干预组在造摸前7天开始给药，给予连翘水煎液H（5g/kg）、M（2.5g/kg）、L（1.25g/kg），每天一次，选用灌胃方式。阳性对照组于造摸前1小时给药，100mg／Kg，腹腔注射。每组的模型制作及在12小时的时间点上留取的标本均同第一章。测各组血淀粉酶（AMY）、谷丙转氨酶（ALT）及TNF-α水平，鲎试剂法测血浆内毒素含量，流式细胞术测外周血Treg百分数，对胰腺及肝脏进行病理学检查及评分，RT-PCR法检测肝脏组织中NF-κBmRNA和Foxp3mRNA表达量，并对上述所有指标统计后进行分析。主要结果与SO组比较，SAP组外周血中的Treg百分数与血浆中的AMY、ALT及TNF-α的含量均于12h时明显升高，且肝脏、胰腺有明显的病理性改变，同时胰腺、肝脏病理学评分均显著高于SO组（P<0.01）。干预组（大鼠死亡率为0）肝脏组织中的上述指标明显下降，NF-κBmRNA和Foxp3mRNA表达的降低与Treg呈正相关（r=0.738，p<0.01）。随连翘剂量增加，AMY、ALT及TNF-α的含量均明显降低，肝脏和胰腺组织炎症明显减轻，高剂量组和阳性对照组相比较无明显差异（p>0.05）。结论1采用5%牛磺胆酸钠造模后，病理学检测证实：胰腺和肝脏组织中出现了不同程度的坏死、水肿、出血及炎细胞浸润，说明大鼠重症急性胰腺炎造模成功。2随SAP的发展，肝功能及病理损害进行性加重，证实SAP时出现了肝功能的障碍和肝损伤。3SAP的进行性发展可引起肝损伤，肝脏组织中NF-κB、Foxp3的含量及外周血中Treg百分率升高，NF-κB高水平激活和Treg大量增多参与SAP肝损伤的发生。4SAP时，应用连翘能显著降低NF-κB的活性及肝脏组织中NF-κBmRNA和Foxp3mRNA的表达，减轻SAP肝损伤的严重程度。连翘通过抗炎、抗内毒素作用及其显著的增强机体免疫的功能对SAP大鼠的肝损伤起着重要的治疗作用。上述研究了NF-κB和Foxp3在重症急性胰腺炎所致肝损伤中的作用机理及连翘对其表达活性和SAP肝损伤保护的影响，从而为治疗重症进行胰腺炎提供新办法。