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目的:探讨逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)快速检测乳腺癌前哨淋巴结(Sentinel Lymph Nodes,SLN)中Mammaglobin及CK19 mRNA以判断SLN状态的灵敏度、特异性以及其检测的临床意义。方法:1根据第八版AJCC肿瘤分期指南,细胞培养乳腺癌T47D细胞株创建淋巴结转移模型,以验证乳腺癌肿瘤细胞的个数与PCR检测的CT值具有直接关系,从而确定RT-PCR用于检测乳腺癌前哨淋巴结的可行性。2选取符合条件的83枚乳腺癌患者前哨淋巴结,以2mm为距对前哨淋巴结进行组织切割,奇数块进行PCR检测,偶数块进行组织病理学检测。以组织病理学结果为金标准,以确定RT-PCR分子检测诊断前哨淋巴结的判读标准。3在临床进行前瞻性研究,对来自150例乳腺癌患者的256枚前哨淋巴结进行检测,以验证该前哨淋巴结的分子检测方法的灵敏度与特异性。4收集并分析该150例乳腺癌患者的临床病理资料,通过分析乳腺癌患者临床病理资料与SLN转移的相关因素,研究分析SLN转移的高危因素。结果:1.根据建立细胞模型,宏转移、微转移、孤立肿瘤细胞、淋巴结阴性随肿瘤细胞增多,RT-PCR CT值越来越小。2.分析83枚乳腺癌患者前哨淋巴结的检测结果,确定乳腺癌前哨淋巴结新鲜样本RT-PCR CT值的计算规则。判读标准:当内参CT值为20-29个循环之间,Mammaglobin的CT平均值、CK19的CT平均值分别与内参的CT平均值的差值ΔCT值均大于4,才可以判定其为阴性淋巴结,若一者小于4,则考虑淋巴结可能存在转移。3.研究分析256枚前哨淋巴结的检测结果,以免疫组织化学结果为金标准。统计学卡方分析,PCR检测的灵敏度为80.49%,特异性为91.55%,阳性预测值与阴性预测值分别为64.71%、96.06%。PCR检测与免疫组化差异无统计学意义(P>0.05)。统计学卡方分析,术中冰冻与免疫组化差异有统计学意义(P<0.05)。术中冰冻与PCR检测差异有统计学意义(P<0.05)。PCR检测比术中冰冻检测灵敏度更高,更接近于免疫组化的结果。4.单因素分析显示肿瘤最大径、临床T分期、脉管有无浸润与SLN状态具有相关性,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示脉管有无浸润是淋巴结转移的独立危险因素。结论:RT-PCR检测在检测前哨淋巴结转移灶>0.2mm时的表现与免疫组化切片类似,并且具有客观和快速的优势,同时证明RT-PCR方法真实可靠,可用于术中决定是否进行腋窝淋巴结清扫,可以成为判定乳腺癌患者预后的重要指标。