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据文献报道,随着社会的发展及环境污染的加重,近几十年来男性不育发生率越来越高。遗传及环境因素对男性生殖能力影响很大,主要表现在两方面:男性人群的平均精子总数较几十年前几乎减少50%,精子质量方面每年以1%的速率下降。根据以上流行病学调查结果,WHO(World Health Organization)2010年发布的第五版《人类精液处理和检验实验室手册》中对精液质量评估标准进行了下调。目前国内外不孕夫妇中因男性因素导致的不育已超过了40%,其中约10%~20%的患者为无精子症。由于男性无精子症尤其是非梗阻性无精子症病因复杂,目前的医疗手段缺乏有效的治疗方法,在经临床干预后配偶仍未取得成功妊娠时,采用供精行辅助生殖技术(Assisted Reproductive Technology ART)作为主要的助孕措施是相对有效并理智的选择。因此,对男方无精子症的病因及早期正确诊断,尽早选择正确的治疗方式,并尽一切努力提高助孕妊娠率是目前国内外各生殖中心关心的重点。
目的:
对男方无精子症的原因进行归纳分析,并进一步探讨影响供精助孕妊娠结局的相关因素。
资料与方法:
1.研究对象:
1.1.供精人工授精选择2009年1月~2011年12月在郑州大学第三附属医院生殖中心接受供精人工授精(Artificial insemination by donor,AID)助孕治疗的1435对不孕夫妇(共进行2054个AID治疗周期)作为研究对象;
1.2.供精体外授精-胚胎移植选择2009年1月~2011年12月在郑州大学第三附属医院生殖中心接受供精体外授精-胚胎移植(In vitro fertilization with donorseman or intracytoplasmic sperm injection with donor seman,IVF-D/ICSI-D)助孕治疗的157对不孕夫妇(共进行170个取卵周期)作为研究对象。
1.3.供精来源及原则精子来源于经国家批准的浙江省计划生育科学技术研究所人类精子库及河南省人类精子库;严格掌握适应症并遵守各项法规和伦理原则。
2.研究方法:
2.1.AID
2.1.1.术前准备明确AID适应症同时排除禁忌症并完善各项相关术前检查。
2.1.2.卵泡监测和授精时机采用阴道超声检查了解患者的子宫内膜及卵泡的发育情况,结合血清雌激素(Esradiol,E2)、黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)、孕激素(Progesterone,P)测定及尿LH监测,综合判断排卵时间并确定授精时机。
2.1.3.精液处理冷冻精液复苏后,采用梯度离心法处理精液。
2.1.4.授精方法和妊娠诊断采用宫腔内人工授精(Intrauterine inseminati-on,IUI),术后第16天晨测血总人绒毛膜促性腺激素(Total human chorionicgonadotropin,T-HCG)及尿HCG,阳性者20天后行阴道超声检查,发现妊娠囊,即为临床妊娠。
2.1.5.临床指标年龄、不孕年限、不孕类型、不孕因素、助孕方案、授精时机、助孕周期数、周期妊娠率、累积妊娠率、流产率、异位妊娠率、多胎率。
2.1.6.分组情况按患者年龄、不孕年限、不孕类型、不孕因素、助孕方案、授精时机、助孕周期数与妊娠结局的关系进行分组;
2.2.IVF-D/ICSI-D
2.2.1.治疗方案及授精方法根据患者的情况分别采用长方案、短方案超促排卵,阴道B超及激素测定监测卵泡发育情况,取卵后4~6h采用复苏的冷冻精液进行常规体外授精(In vitro fertilization,IVF)或卵胞浆内单精子注射(Intracytoplasmicsperm injection,ICSI),取卵后第3天移植1~3个胚胎;胚胎移植后14d测血HCG,阳性者15天后行B超检查有孕囊者确定临床妊娠,之后定期随访。
2.2.2.监测指标
2.2.2.1.实验室指标获卵数、2PN(Prokaryotic number)胚胎数、正常受精数、正常卵裂数、优质胚胎数、获卵率、正常受精率、正常卵裂率、优质胚胎率及胚胎种植率。
2.2.2.2.临床指标HCG日E2、LH、P,临床妊娠率、异位妊娠率、早期流产率及解冻周期妊娠率。
2.2.2.3.分组情况(1)根据妊娠结局分为妊娠组与未妊娠组,对两组间HCG日激素水平进行比较;(2)根据HCG日孕酮(P)水平分为A组P≤0.9μ g/L、B组P>0.9μg/L组,对两组间的各项指标进行比较。
3.统计学处理
所有数据均采用SPSS17.0软件包进行统计,正态计量资料行t检验、计数资料行x2检验,非正态资料行秩和检验,检验水准α=0.05。
结果:
1.AID-IUI
1.1.年龄≥35岁组妊娠率低于<35岁组,不孕年限≥10年组妊娠率低于<10年组,差异均有统计学意义(P<0.05)。
1.2.既往有孕育史妇女组妊娠率低于无孕育史妇女组,伴盆腔输卵管因素妇女组妊娠率低于无盆腔输卵管因素妇女组,但统计均无明显差异(P>0.05);
1.3.助孕方案中促排卵周期妊娠率低于自然周期妊娠率,差异有统计学意义(P<0.05);
1.4.授精时机中排卵前或后短时内单次授精妊娠率低于排卵前、后双次授精妊娠率,但统计无明显差异(P>0.05);
1.5.随着治疗周期数的增加周期妊娠率下降,但累积妊娠率随之增高,以第2周期增高幅度最大,第3、4、5周期妊娠率基本平齐。
2.IVF-D/ICSI-D
2.1.妊娠组HCG日孕酮水平明显低于未妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);
2.2.HCG日孕酮(P)水平P>0.9μg/L组较P≤0.9μg/L组可利用胚胎率、优质胚胎率降低(P<0.05),胚胎种植率和临床妊娠率降低(P<0.05),而获卵率、血清E2水平升高(P<0.05),两组受精率、卵裂率及冻融胚胎移植周期临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)
结论:
1.不孕妇女的年龄,不孕年限,助孕方案是影响AID妊娠结局的重要因素;
2.对行2~3个AID周期不孕的患者可改行供精体外授精-胚胎移植助孕。
3.HCG日孕酮水平对卵子质量及子宫内膜容受性有一定程度的影响。