人工冬虫夏草不同部位有效成分分析及其多糖抗肝损伤作用

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jw_wanghaibing
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目的:研究湖南益康公司培育的人工冬虫夏草不同部位(子实体、菌丝体和固体培养基)中有效成分(多糖、核苷类、氨基酸)的含量和组分差别,并初步考察了其多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用,旨在为进一步开发利用人工虫草资源提供有价值的参考。方法:(1)采用水提醇沉法分别提取人工虫草子实体、菌丝体、固体培养基干品,石油醚脱脂,sevag法除蛋白,活性炭脱色,得总多糖,UV测定虫草不同部位总多糖含量。(2)总多糖经DEAE-52离子柱和Sephadex G-100凝胶柱分离纯化后得精多糖,HPLC-ELSD测定精多糖重均分子量。(3)提取人工虫草不同部位中的核苷类物质,RP-HPLC测定虫草素、腺苷和腺嘌呤的含量。(4)采用L-8800氨基酸分析仪,以茚三酮为衍生试剂,柱后衍生法测定人工虫草不同部位中氨基酸含量。(5)初步研究人工虫草不同部位多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用。建立小鼠肝损伤模型,给药一周后,UV测定肝指标系数变化,并对肝细胞的组织形态学进行观察。结果:(1)虫草子实体、菌丝体、固体培养基总多糖质量分数分别为10.40%、4.73%、1.86%。(2) HPLC测定虫草多糖,其重均分子量在5000~70000范围内,方法线性良好。测得子实体多糖分子量为49597、菌丝体多糖分子量为15002;固体培养基含有三种多糖,分子量分别为30521、5 980、4 453。(3)人工虫草子实体、菌丝体和固体培养基中腺嘌呤含量(μg·g-1)分别为197.29、144.05、70.08;腺苷分别为1302.52、635.02、171.73;虫草素分别为1356.92、1101.04、350.96。(4)人工虫草固体培养基、子实体、菌丝体中都含有十七种氨基酸,总氨基酸质量分数分别为8.32%、21.68%和23.19%。且都含有八种必需氨基酸,质量分数分别为3.74%、8.11%和8.88%。(5)不同部位虫草多糖具有显著地抑制CCl。引起的小鼠血清ALT、AST及肝脏MDA含量的升高,以及肝脏SOD含量的降低,并能显著地减轻CCl4引起的肝小叶内的灶性坏死。结论:(1)人工虫草菌丝体和固体培养基中都含有一定量(多糖、氨基酸、核苷类)有效成分。(2)虫草子实体、菌丝体和固体培养基多糖组对小鼠CCl4肝损伤具有显著的保护作用,但三组之间未见明显差异,菌丝体和固体培养基在抗肝损伤作用方面有被进一步开发利用价值。
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