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目前,聚集诱导发光化合物发展迅速,尤其是四苯基乙烯类化合物,由于其合成方法简单、修饰性强等优点,引起了研究者广泛的关注。本论文以四苯基乙烯衍生物为荧光探针,基于其聚集诱导发光性能,设计了三种荧光传感器,分别对肌红蛋白、甲基化酶、蛋白激酶进行分析检测。具体思路如下:(1)基于四苯基乙烯季铵盐的自身正电性,利用肌红蛋白与其核酸适体的特异性结合,设计实验方案。当肌红蛋白不存在时,核酸适体与四苯基乙烯季铵盐通过正负电相结合,聚集诱导发光效应产生,荧光信号较高;当肌红蛋白存在时,核酸适体与肌红蛋白特异性结合,四苯基乙烯季铵盐不能堆聚在核酸适体上,荧光信号较低。以此设计了一种简易、快捷、灵敏度高的荧光生物传感方法用于检测肌红蛋白。当肌红蛋白浓度为0.510μg/mL范围时,荧光强度与肌红蛋白浓度呈良好的线性关系。(2)DNA序列的长短对四苯基乙烯季铵盐的堆聚产生的荧光强度有一定的影响,因此我们设计TdT酶无模板地延长DNA序列,以增强荧光效果。设计含有甲基化特定位点和3’-Dabcyl末端修饰的茎环DNA序列,经过甲基化酶、Dpn I和TdT酶的一系列作用后,茎环被剪切,3’-Dabcyl末端被释放,其余DNA片段被延长。游离在溶液中的荧光探针堆积在延长了的DNA链上,引起聚集诱导发光效应产生,通过收集荧光信号,实现了对甲基化酶的检测。通过实验结果可知,当Dam MTase浓度在0.5100 U/mL时,荧光强度与目标物的浓度呈现良好的线性关系。(3)四苯基乙烯基团本身具有较强的疏水性,利用Click反应结合亲水多肽和TPE-N3,使得探针具有良好的亲水性,在稀溶液中自身荧光强度较弱。基于羧肽酶的剪切和蛋白激酶对特定多肽位点进行磷酸化的特点,设计了一种检测蛋白激酶CKII活性的实验方案。没有CKII处理时,羧酸残基不会被蛋白激酶磷酸化,多肽将会被CPY完全消化,荧光物质被释放在溶液中,由于其疏水性较强,TPE小分子会产生聚集,使得荧光信号增强。在CKII处理后,磷酸化后的残基使得羧肽酶剪切作用被迫停止,多肽不会被完全消化。剪切一半的多肽链亲水性依然较强,因此不会产生聚集诱导发光效应,荧光信号不会增强。当CKII的浓度在0.180 m U/μL范围时,荧光强度与目标CKII的浓度有很好的线性关系。