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目的干细胞壁龛是干细胞生存的特定微环境,直接影响HSC的自我更新、增殖和分化。造血干细胞壁龛细胞(包括成骨细胞和内皮细胞)均高表达富含半胱氨酸的酸性分泌型蛋白(SPARC)。本文通过分析SPARC基因缺失型小鼠体内造血组织结构和造血发育特点,以及外源性SPARC对造血干细胞的迁移和增殖作用,了解SPARC对造血的调控作用。方法1) SPARC基因缺失杂合子小鼠交配,繁育出子代后,提取鼠尾gDNA,应用PCR方法扩增SPARC和Neo基因；然后对扩增产物进行限制性酶切反应；WB检测经PCR方法鉴定出的SPARC基因各表型小鼠脾脏组织SPARC蛋白的表达。2)比较SPARC基因缺失纯合子小鼠和野生型对照鼠骨小梁数量,脾脏的大小、结构特点和外周血细胞分类计数；应用流式细胞技术和LTC-IC、集落培养方法检测骨髓中造血干／祖细胞的含量；体外检测外源性SPARC对CD34+细胞的扩增,迁移的影响。结果1)PCR扩增片段经限制性酶切反应证实为特异性SPARC和Neo基因扩增产物；经PCR方法鉴定得到的SPARC基因纯合子小鼠不能检测到SPARC蛋白的表达,而野生型小鼠可检测到SPARC蛋白的表达；2) SPARC基因缺失小鼠较野生型小鼠单位体积内的骨小梁数目减少34.5%,骨小梁分离度增加65.6%；缺失鼠脾脏重量、脾脏／体重比均大于野生型对照鼠；脾脏组织切片HE染色显示缺失鼠白髓面积明显增大；缺失型小鼠体内造血与野生型小鼠比较有如下差异：外周血WBC、HGB、HCT均减少；RBC减少,但无统计学差异；骨髓KSL (c-kit+, sca-1+, lin-)细胞的比例、KSL细胞总数均减少；长期培养启动细胞(LTC-IC)明显减少；BFU-E形成数明显减少,CFU-GM数量无明显差异；此外,SPARC基因缺失鼠骨髓细胞自杀率明显低于野生型对照鼠。CD34+细胞,在有或没有SPARC的培养体系中培养7天,加入SPARC组造血干细胞的增殖明显增加。外源性SPARC促进CD34+细胞迁移,加入SPARC后CD34+细胞迁移率增加了1.34倍。结论PCR方法可快速准确鉴定出SPARC基因各表型小鼠；SPARC基因缺失型小鼠体内存在造血组织结构和造血发育异常,造血干/祖细胞数量减少。外源性SPARC在体外能促进CD34+细胞增殖和迁移。