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用限制性内切酶EcoRI单切已经构建好的含有NTR基因的T-easy/NTR质粒,将切出的NTR基因片段克隆入原核表达载体pRSET B中,经过EcoRI单酶切和HindIII/XbaI双酶切鉴定以及测序表明序列均正确。以IPTG诱导NTR-pRSET B/BL21表达出相对分子质量( M r)约为27kDa的可溶性融合蛋白。和硝基还原酶的大小相等。使用Ni~+-NTA亲和沉析纯化后得到的可溶性蛋白,免疫家兔得到了特异识别融合蛋白的抗体,同时该抗体能检测出真核表达的硝基还原酶NTR。免疫印迹的结果显示原核表达的NTR融合蛋白具有较好的免疫学活性;自制抗NTR兔免疫血清可为进一步研究NTR基因在真核细胞中的表达及用于治疗提供了一种有用的试剂。