肝素和鲍鱼多糖B1的乙酰解研究

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多糖是生命大分子科学的一个重大前沿领域,其重要的生物功能和良好的生物活性以及在生命科学和医药中的巨大作用,使得多糖的研究成为最具吸引力的研究领域之一。本论文的前言部分就多糖的生物学意义及其研究方法等进行了综述。 论文第二部分对肝素进行了乙酰解研究。对肝素分别在加热条件下于H2SO4/Ac2O/AcOH、FeCl3/Ac2O、HClO4/Ac2O体系和低温H2SO4/Ac2O条件下进行乙酰解,发现低温H2SO4/Ac2O条件下乙酰解效果较好。低温乙酰解产物经石油醚沉淀,柱色谱分离,得到黄色粉末GAc。GAc经ESI-MS分析,结果表明含有全乙酰化的二糖、三糖、四糖、五糖、六糖及其开环结构,推测结构为糖醛酸和葡萄糖胺交替出现构成,与文献报道的肝素结构相同,且其糖醛酸在乙酰解过程中并未发生改变,说明在低温条件下用H2SO4/Ac2O体系对含有糖醛酸的多糖进行乙酰解,是研究该类多糖结构的一个较理想的方法。 论文第三部分从海洋软体动物鲍鱼内脏中分离得到多糖B1进行了研究。通过酶解、醇沉方法得到粗多糖,粗多糖经脱蛋白、脱色、凝胶色谱(GPC)纯化得到白色固体B1。硫酸-苯酚法测定B1的总糖含量为91.4%;B1用GPC分析为一对称单峰,表明B1为分子量均匀分布的多糖;用粘度法测定其分子量为1.4×104;元素分析、红外光谱和离子色谱表明B1是硫酸酯多糖;用完全酸水解、糖腈乙酸酯衍生化、GC-MS等方法测定其单糖组成,结果表明B1主要由半乳糖(88.34%)以及少量葡萄糖(10.46%)和甘露糖(1.20%)组成。在加热条件下于H2SO4/Ac2O/AcOH体系中对进行B1乙酰解,产物通过柱色谱分离,得到五乙酰化的半乳糖单糖以及寡糖混合物。寡糖部分进行了ESI-MS分析,表明含有全乙酰化的二糖、三糖、四糖、五糖、六糖及其开环结构,若能采用有效的分离手段,得到单一寡糖组分,对于分析B1结构有重要意义。ESI-MS和碳谱分析,表明该多糖是含糖醛酸的硫酸酯多糖,其详细结构有待于进一步的研究。
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