射干麻黄汤对哮喘大鼠气道炎症及外周血Th1/Th2平衡的影响

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目的与意义:本研究通过射干麻黄汤干预哮喘大鼠模型,观察大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞及外周血中IL-4和IFN-γ的变化,探讨其对控制哮喘气道炎症和Th1/Th2失衡的作用,揭示其治疗支气管哮喘的作用机制,为临床应用奠定理论基础。方法:①分组:实验用雌性大鼠40只,适应性饲养一周后,随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组和射干麻黄汤组,每组10只。②造模[1]及处理:哮喘模型组:第0、7天腹腔注射1ml的抗原液(含卵蛋白100 mg、氢氧化铝干粉100mg、灭活百日咳杆菌5×109个)致敏,第7~21天用超声雾化器给大鼠雾化吸入10g/L卵蛋白生理盐水悬液,30min/d,至出现烦躁不安、呼吸急促、腹肌抽搐、挠鼻等哮喘发作表现。空白对照组:腹腔皮下注射0.9%生理盐水1ml。地塞米松组:致敏同哮喘组,再予以灌服地塞米松1mg/(kg.d);以生理盐水15ml加入地塞米松3mg充分混匀后按体重计算灌服量。射干麻黄汤组:致敏同哮喘模型组,再予以灌服射干麻黄汤20g/(kg.d);生药含量为2g/ml。药物组方:射干9 g,麻黄12 g,半夏12 g,紫菀9 g,款冬花9 g,大枣l2 g,细辛3 g,生姜12 g,五味子l2 g。将上述药物按传统方法煎制成200ml,使每毫升溶液含生药量为2 g。③BALF收集:造模及相应处理完成后24小时,将大鼠麻醉后,做气管插管,抽取37℃生理盐水4ml,缓慢注入肺内。轻轻按摩30秒,然后缓慢回抽,再将所得液体缓慢注入肺内,反复10次,计数细胞总数并分类。④细胞因子检测各组大鼠BALF抽取完毕后,分离颈动、静脉,从颈动脉取血3ml,加肝素钠抗凝,静置2小时后,2000r/min离心15分钟,提取血浆保存-20℃冰箱放置待测细胞因子。细胞因子检测采用酶联免疫吸附法行IL-4及IFN-γ水平检测。结果:①哮喘模型组大鼠炎症细胞分别为:细胞总数(32.5±6.02 )×106/ L、嗜酸性粒细胞(3.94±0.53)×106/ L、中性粒细胞(8.46±1.11)×106/ L、淋巴细胞(8.05±1.07)×106/ L,均显著高于正常组(P<0.01)。②地塞米松组细胞总数(10.0±2.83)×106/ L、嗜酸性粒细胞(1.71±0.54)×106/ L、淋巴细胞数(2.76±0.91)×106/低于地塞米松组(21.1±3.35)×106/ L、(2.25±0.68)×106/ L和(3.66±0.68)×106/ L(P <0.05),中性粒细胞数在两治疗组分别为(4.43±0.78)×106/ L和(5.37±1.16)×106/ L,两组间无统计学意义(P>0.05)。③大鼠外周血IL-4检测,哮喘模型组大鼠(59.73±11.96)pg/ mL较空白对照组(35.29±5.66)pg/ mL明显增加(P<0.01),两干预组大鼠(42.43±7.02)pg/ mL、(40.65±5.78)pg/ mL较模型组血清中IL-4(59.73±11.96)pg/ mL明显减少(P<0.01),射干麻黄汤组(40.65±5.78)pg/ mL与地塞米松组(42.43±7.02)pg/ mL血清中IL-4无明显差别(P>0.05)。④大鼠外周血IFN-γ/IL-4比较,哮喘模型组大鼠(0.72±0.18)较空白对照组(2.04±0.13)明显减少(P<0.01),射干麻黄汤组(1.19±0.24)、地塞米松组(1.26±0.29)大鼠较哮喘模型组(0.72±0.18)血清中IFN-γ/IL-4明显增加(P<0.01);射干麻黄汤组(1.19±0.24)与地塞米松组(1.26±0.29)血清中IFN-γ/IL-4无差别(P>0.05)。结论:射干麻黄汤可以减轻哮喘大鼠气道炎症,调节哮喘Th1/Th2失衡,降低气道高反应性,达到治疗哮喘的效果,这可能是其治疗哮喘的作用机制之一。
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