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目的:乳腺癌是常见的恶性肿瘤之一。在中国,乳腺癌位列女性恶性肿瘤发病率的第1位,在城市和农村中乳腺癌的发病率均呈不断上升的趋势。乳腺癌的早期诊断及个体化治疗是患者取得良好预后的关键,因此寻找乳腺癌诊断和预后的标志物以及分子治疗靶点依然是目前研究的热点。多项研究表明miRNA与肿瘤的发生发展密切相关。近年来的研究发现,miR-218可通过多种信号转导途径参与肿瘤的发生和发展。目前,miR-218在乳腺癌中的功能尚不完全清楚。本研究应用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌组织及其相应癌旁组织中miR-218的表达情况,应用脂质体转染的方法使乳腺癌MCF-7细胞过表达miR-218,研究其对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和细胞周期分布的影响,通过在线靶基因预测软件预测miR-218的靶基因并进行验证,为乳腺癌的诊断及治疗提供新的思路。方法:1收集2013年11月~2014年11月河北医科大学第一医院手术切除的34例乳腺癌组织及其相应的癌旁组织标本。标本离体后迅速置于液氮中,于-80℃冰箱保存。所有患者手术前均未接受放疗、化疗及内分泌治疗。2采用实时荧光定量PCR法(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miR-218在乳腺癌组织及其相应癌旁组织中的表达。3选取乳腺癌MCF-7细胞在PRMI 1640培养液中进行细胞培养。4采用脂质体转染法对MCF-7细胞进行转染。将转染miR-218 mimic组作为试验组,将转染miR-218 NC(miR-218 negative control)组作为阴性对照组,转染时只加入等量脂质体lipofectamine 2000组为空白对照组。5 qRT-PCR法检测试验组、阴性对照组和空白对照组中miR-218的表达。6 MCF-7细胞转染后1天、2天、3天、4天、5天,分别应用CCK-8法检测5个时间点的光密度(OD)值,绘制细胞生长曲线,观察miR-218对细胞增殖的影响。7应用流式细胞技术检测转染miR-218后MCF-7细胞凋亡及周期分布情况,比较对照组和试验组间的差异。8应用在线靶基因预测软件Target Scan和MiRanda预测miR-218的靶基因。9应用qRT-PCR法检测试验组、阴性对照组和空白对照组中BMI1mRNA的表达。10应用qRT-PCR法检测BMI1 mRNA在乳腺癌组织及其相应癌旁组织中的表达。11应用SPSS 19.0软件和Graph Pad Prism 5.0软件对试验的结果数据进行统计分析。正态分布的数据以均数±标准差表示,非正态分布的数据以P50(P25,P75)表示,配对样本间的比较采用Wilcoxon秩和检验,Spearman法进行相关性分析,两独立样本间的比较采用t检验。多组间数据的比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1 miR-218在患者癌组织中的表达量为43.89(10.78,100.89),癌旁组织中的表达量为171.14(58.59,343.31),乳腺癌组织中表达水平明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。2试验组细胞中miR-218的表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。阴性对照组和空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。3试验组细胞的增殖能力受到明显抑制(P<0.05)。4试验组细胞G1期细胞所占百分比明显减少,而S期细胞所占百分比明显增多,细胞凋亡率明显增加(P值均<0.01)。5通过在线靶基因预测软件Target Scan和MiRanda发现BMI1可能是miR-218潜在的靶基因。6试验组细胞中BMI1 mRNA的表达水平明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。阴性对照组和空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。7 BMI1 mRNA在患者癌组织中的表达量为0.0078(0.0035,0.0131),癌旁组织中的表达量为0.0053(0.0031,0.0076),乳腺癌组织中表达水平明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。并且,乳腺癌组织中miR-218与BMI1 mRNA的表达呈负相关(r=-0.419,P<0.05)。结论:1 miR-218在乳腺癌组织中低表达,提示miR-218在乳腺癌的发生和发展中可能发挥抑癌基因的作用。2过表达miR-218可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、诱导其凋亡并可改变细胞周期的分布。3 BMI1可能为miR-218的作用靶点。深入探讨二者间的相互关系可为乳腺癌的诊治及阐明miR-218的抑癌机制提供一条新的思路。