猪败血性链球菌活疫苗发酵培养及冻干工艺研究

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本研究以猪败血性链球菌活疫苗ST171的生产工艺优化为目的,对其发酵工艺、冻干工艺进行了系统研究。在发酵培养工艺方面,首先对该菌株的培养基和培养条件进行了优化,通过对四种培养基培养菌数的对比分析,从中选取改良马丁干粉为该菌株的适合培养基,并对其初糖浓度、血清添加量、最佳培养时间进行研究。其次对搅拌转速、通气量、乳酸含量这些影响产量的发酵条件进行优化,优化后发酵液中活菌数为6.0×10~9CFU/ml,比优化前的产量提高了3倍,为疫苗的大规模生产提供了理论和实验依据。为了研究如何减少代谢副产物乳酸的含量,借鉴前人在其他领域所取得的研究成果,设计了流加补料的几种补料-分批的培养方式,实验得出恒速流加培养方式,保持一定的糖浓度,有助于延长发酵液菌体生长的稳定期。作为疫苗生产的最后一关键环节—冻干,对原先冻干曲线进行调整,通过选择合适的冻干曲线,冻干率从开始的50%提高到80%以上,以2.5ml/瓶装量最终产品超过100头份/瓶的规程最高标准。并对其耐老化性进行了初步研究。此外,还研究了不同配方冻干保护剂对冻干后活菌数的影响。
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