手足口病(Hand，footandmouthdisease，HFMD)及相关临床综合征是危害儿童健康的重要疾病，肠道病毒71型(Enterovirus71，EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxsackievirusA16，CA16)是引起手足口病的两种主要的病原，常相伴造成手足口病的暴发流行。EV71和CA16均为单股正链RNA病毒，属于小RNA病毒科(Picornaviridae)，肠道病毒属(Enterovirus)成员。EV71是嗜神经性病毒，除了引起儿章HFMD外，容易导致严重的神经系统相关并发症，致死率高，是脊髓灰质炎病毒受到控制后肠道病毒中颇受瞩目的一员。CA16是导致儿童HFMD的另一种重要病原，所引起的临床症状与EV71感染引起的HFMD难于区别，但通常情况下，CA16感染一般不引起严重的神经系统相关的疾病，由于其亚临床感染常常被忽略。以往对CA16的研究主要集中于与EV71感染的鉴别诊断上，近年来由于CA16与心肌炎、心包炎及其它严重疾病的相关而逐渐受到重视。　　 目的：　　 1、调查我国浙江及周边地区2010年肠道病毒感染率；了解本地区肠道病毒感染的流行病学特征；明确影响手足口病病原检出率的影响因素，为手足口病的有效防控提供科学依据。　　 2、通过对肠道病毒的VP1片段进行核苷酸序列测定，分析浙江地区肠道病毒分离株的基因型别，进一步了解肠道病毒浙江株的分子生物学性状及与其他肠道毒株的遗传进化距离，完善我国肠道病毒的基因型和亚型分类资料，及时监测本地区的肠道病毒流行株以及进行疫苗的研制打下基础。　　 方法：　　 1、标本检测及病毒分离：采用肠道病毒核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)对手足口患者标本的各类标本进行检测，将部分肠道病毒检测阳性标本接种到人横纹肌肉瘤细胞(RD细胞)进行病毒的分离培养。　　 2、分子生物学实验：对分离毒株采用肠道病毒核酸检测试剂盒进行验证，并使用自己设计的EV71和CA16VP1区特异性引物分别对毒株进行VP1片段的扩增。　　 3、生物信息学分析：参考EV71和CA16各型别的代表株以及中国大陆其他地区测定的EV71病毒序列，应用DNASTAR、DANMAN等生物学软件对浙江地区EV71和CA16的核苷酸及氨基酸序列进行系统的分析。　　 结果：　　 1、采用肠道病毒核酸检测试剂盒共检测手足口临床诊断病例1011份标本，其中541份标本肠道病毒通用引物检测为阳性，293份标本EV71阳性，180份标本CoxA16阳性，其它型肠道病毒56份。不同标本的类型的肠道病毒检出率不同，不同时间采集的标本检出率也有差别。　　 2、在603例HFMD实验室诊断病例中，大部分以轻症为主，只有少部分会出现神经系统和呼吸系统的并发症。在重症病例中，以EV71感染为主。　　 3、1～6岁组是肠道病毒感染的主要人群，男女发病基本相同，以散居儿童为主。　　 4、6株EV71之间的VP1基因核苷酸同源性为92.2％-98.5％，氨基酸同源性为99.0％-100％，通过基因比对，发现此次6株EV71属于C4亚型。　　 5、将4株浙江地区分离株的核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性比对，核苷酸同源性为91.8％～99.8％，氨基酸同源性均为100％。4株杭州分离株在进化树中分别归属于B亚型。　　 结论：　　 1、浙江及周边地区的手足病患者的病源谱构成以EV71和CA16为主。　　 2、不同标本类型其肠道病毒的阳性检出率不同。最好在发病的早期采集患者的各类标本进行检测。　　 3、由肠道病毒引起的HFMD病例中一般症状较轻，而HFMD的重症患者以EV71感染为主。　　 4、男性和女性均可感染肠道病毒发生HFMD;1～6岁组儿童是肠道病毒感染的主要人群，以散居儿童为主。　　 5、2010年浙江地区流行的EV71毒株属于C4亚型，与近年在中国大陆发现的其他分离株的流行一致。重症与轻症患儿之间的氨基酸序列未见明显差别。　　 6、CA16毒株基因分型及系统进化树分析表明，浙江地区CA16病毒流行株属于B亚型，与浙江周边分离株流行一致。核苷酸变异为散在分布的无义突变，氨基酸未发现有意义的变异。