以纳米粒子为探针的蛋白质及免疫分析

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蛋白质及免疫分析在生命科学研究中具有重要的意义,广泛应用于生物学、医学诊断等方面。随着生命科学发展,已有方法的局限性已日益显露出来,所以研究普遍适用性好、操作简便、灵敏度高的蛋白质及免疫检测新方法显得越来越迫切。本文在纳米粒子与蛋白质的相互作用的基础上,分别研究了以Fe(OH)3纳米粒子为探针的蛋白质检测方法和以金纳米粒子为探针的化学发光免疫分析法。Fe(OH)3 纳米粒子与蛋白质通过静电力相互作用,形成大的聚集体,产生强烈的光吸收,其增强的吸光度与蛋白质的浓度在0.1~10.0 mg l-1 范围内呈良好的线性关系。由此建立了以Fe(OH)3纳米粒子为探针, 用吸光光度法灵敏测定蛋白质的新方法。该方法对牛血清蛋白的检出限为34 μg l-1,用于测定人血清中蛋白质含量,获得了可靠的分析结果。基于金纳米粒子作为生物探针的独特优势及免疫反应的高度特异性,本文研究了以金纳米粒子为探针的化学发光免疫分析法。首先,通过人IgG、羊抗人IgG 和金标兔抗羊IgG 之间的免疫反应,形成一个三明治的复合体,然后用化学发光分析法测定复合体上金的含量,以确定目标抗体-羊抗人IgG 的含量。该法得出羊抗人浓度的对数在5 ng ml-1 ~10 μg ml-1范围内与化学发光强度有良好的线性关系,检出限为1.5 ng ml-1。结果表明,该化学发光免疫分析法灵敏度高、线性范围宽,是非常有发展潜力的一种免疫分析方法。
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