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肺癌是目前全世界范围内发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一。按组织学分类，肺癌可以分为两大类:小细胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)和非小细胞肺癌(non small cell lung cancer，NSCLC)，SCLC占所有病例的20％，其余80％左右为NSCLC，包括鳞癌、腺癌、大细胞癌等类型。手术、放疗以及化疗等多学科综合治疗是指南推荐的NSCLC的首选治疗方式。由于NSCLC早期的典型临床症状和体征并不明显，约2/3的NSCLC患者在确诊时已发展为中晚期，失去手术根治机会。而且，超过一半的NSCLC患者尽管经过多线积极治疗仍会出现局部复发或远处转移。传统的化疗药物因特异性差、毒副作用大，临床应用有一定的局限性。选择恰当的治疗药物，有的放矢的进行个体化治疗，是目前肿瘤治疗的发展方向。肿瘤分子靶向药物治疗因其具有特异性好，副作用小的优点，正逐渐成为临床肿瘤个体化治疗的主流。表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor, EGFR)在NSCLC的发生发展过程中起了重要作用，常在多种肿瘤细胞中表达。EGFR信号转导通路参与肿瘤细胞增殖、凋亡、转移等多种恶性肿瘤生物学过程。随着人们对肿瘤的发生、发展、转移及复发的分子机制认识越来越清晰，近年来以表皮生长因子受体为靶点的小分子酪氨酸激酶抑制剂（epidermalgrowth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor，EGFR-TKI）在晚期NSCLC治疗方面取得了巨大的进步。随着EGFR-TKI在临床的广泛应用，EGFR-TKI的耐药已成为临床靶向治疗亟待解决的问题。EGFR-TKI的耐药分为原发性耐药和继发性耐药。原发耐药是指首次使用EGFR-TKI治疗后未曾出现过临床获益或临床获益≤3个月，即在症状改善，病灶控制，生存时间等方面无明显益处。7-13％的EGFR敏感突变的NSCLC患者一线EGFR-TKI治疗无效。继发性耐药是指患者接受EGFR-TKI治疗后出现疗效（肿瘤缓解、进展延迟及症状改善等＞3个月）而后又恶化的情况。 目的：近年来肿瘤表观遗传改变与耐药之间的关系引起了越来越多研究者的关注，microRNA(miRNA)作为表观遗传学领域的研究新星备受关注。最近研究发现，miRNA能够参与调控细胞生长、凋亡及分化;miRNA的表达与癌症相关，并在肿瘤的形成过程中发挥着重要的作用。超过50％的miRNA基因位于癌症相关的基因组区域或脆性位点上，这显示miRNA在人类癌症的发生发展中发挥着更为重要的作用。因此，其与肿瘤耐药的联系，也成为近年来研究的热点。结合近年研究发现miRNA在肿瘤耐药中的作用，本研究应用microarray和荧光定量RT-PCR技术对比分析经EGFR-TKI治疗的EGFR敏感突变NSCLC患者血浆miRNA，寻找耐药相关miRNA分子标志，为临床合理选择治疗药物提供依据。 方法：本研究共纳入118例EGFR敏感突变的NSCLC患者，给予口服吉非替尼(250mg/d)或厄洛替尼（150mg/d）治疗，治疗3个月后按临床疗效把病人分为原发耐药组和非原发耐药组。选取其中8例进行了全miRNA表达谱芯片分析，筛选出原发耐药组与非原发耐药组之间显著差异表达的血浆miRNA，进一步扩大样本量应用荧光定量RT-PCR验证差异表达的miRNA，分析miRNA表达量和EGFR-TKI治疗敏感突变型NSCLC患者原发耐药之间的关系。运用Trget Scan、miRDB软件预测差异表达的miRNA可能调控的靶基因。表达谱芯片和RT-PCR共同挑选的显著差异的miRNA，运用IPA分析可能的信号通路。 结果：1)通过miRNA表达谱的差异性分析，获得16个有显著表达差异的miRNA,其中15个表达下调，1个表达上调。 2)荧光定量RT-PCR验证结果表明，血浆中9个miRNA(hsa-miR-744-5p、hsa-miR-138-2-5p、hsa-miR-3153、 hsa-miR-4791、hsa-miR-4803、hsa-miR-548aq-5p、hsa-miR-372-5p、hsv2-miR-H19、hsa-miR-4796）在原发耐药与非原发耐药者间有显著性表达差异，P值均小于0.05。 3)挑选了表达显著上调的2个mi RNA预测其靶基因，结果提示miRNA可能参与EGFR-TKI原发耐药的调控。功能分析表明这些miRNA主要参入调控ABCE1/Ago2为核心的信号通路及分子网络，而影响重要的细胞功能，与肿瘤发生发展、凋亡和侵袭转移密切相关。 结论：经过miRNA芯片初步筛查和进一步的荧光定量RT-PCR的验证，本研究发现EGFR-TKI治疗敏感突变型NSCLC的原发耐药和非原发耐药患者血浆中表达水平显著差异的miRNA，功能分析显示这些miRNA参与细胞重要功能调控，但这些差异表达的miRNA参入调控EGFR-TKI耐药的明确分子机制有待进一步阐明。本研究为进一步探讨血浆miRNA在EGFR-TKI原发耐药形成机制中的作用奠定了初步分子基础，为有效治疗NSCLC提供新的思路。