微生物抗菌肽的制备及其抑菌性质研究

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抗菌肽是一种具有抗菌作用的多肽,能够抑制或杀死多种致病菌,有代替抗生素的潜能。本论文研究了侧孢短芽孢杆菌S62-9发酵所产抗菌肽的提取制备及其抑菌性质。在抗菌肽的提取制备过程中,首先要对发酵液进行除菌,试验结果表明用121℃高压蒸汽灭菌可以快速彻底的去除发酵液中的菌体。本论文中建立了1种新型的抗菌肽分离纯化方法:活性炭吸附法,结果抑菌活性回收率达到90%以上,纯化倍数达到15倍。分离纯化后液体经旋转蒸发浓缩、真空冷冻干燥制得固态产品。本论文对抗菌肽的抑菌性质进行了研究。该抗菌肽抑菌谱比较广,对金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特菌、蜡样芽孢杆菌、藤黄微球菌、乳酸乳球菌、沙门氏菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌等典型的G+细菌和G-细菌均有不同程度的抑制作用。该抗菌肽具有很强的热稳定性,121℃处理15 min活性损失30%左右,100℃处理30 min活性损失20%左右。该抗菌肽具有宽广的pH稳定性,将抗菌肽在pH 2-11的条件下30℃处理2 h,抑菌能力稳定,pH 6抑菌活性损失最大,20%左右。该抗菌肽对α-淀粉酶和胃蛋白酶稍敏感,对蛋白酶E、胰蛋白酶、溶菌酶、酯酶不敏感。该抗菌肽对十二烷基磺酸钠(SDS)和三氯乙酸(TCA)敏感,对甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇、吐温-20、吐温-80、冰醋酸、巯基乙醇和乙二胺四乙酸(EDTA)均不敏感。将抗菌肽制备成饲料添加剂,该饲料添加剂具有抑菌活性,且真空包装后4℃储藏稳定性良好,6周之内活性基本不损失,为在饲料中应用奠定基础。
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