Ming氏膨胀型胃癌细胞系的建立

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目的: 建立Ming氏膨胀型胃癌细胞系,探讨其生物学特性,为利用Ming氏分型研究胃癌的发生机理提供一个实验模型。   方法: 通过混合酶消化法进行胃癌原代培养进而建立细胞系。通过细胞形态学观察、细胞免疫组织化学染色、细胞倍增时间测定、核型分析、琼脂糖集落形成实验、平板克隆实验、免疫缺陷小鼠体内成瘤实验揭示其生物学特性。   结果: 原代培养经纯化传代成功建立一个Ming氏膨胀型胃癌细胞系。显微镜下细胞呈上皮样,单层贴壁生长,有重叠生长现象。除处于有丝分裂阶段和衰老退变的细胞外,以梭形细胞、多边形细胞为主。细胞HE染色见胞浆轻度嗜碱,核大、明显,核仁清晰可见,核浆比例增大,可见多核巨细胞。细胞倍增时间(PDT)为60 h。软琼脂细胞集落形成率约为45.8%;平板克隆形成率约等于8.13%。细胞免疫组织化学染色显示:细胞Ⅳ型胶原表达阳性,胞浆内均匀染色;角蛋白染色呈强弱不同的阳性表达,胞浆均匀淡染;质子泵染色显示大部分胞浆及胞膜弥漫深染,呈强阳性表达;胞浆层粘连蛋白均匀深染,呈强阳性表达;Ki-67染色显示细胞核呈褐色,胞浆及胞膜未着色,200倍镜下随机取5个视野计数平均染色率约为80.6%; CEA染色显示胞浆内弥漫着色,染色较深,呈强阳性表达;波形蛋白染色见胞浆均匀着色,提示表达阳性;E-钙蛋白染色胞浆内染色较淡,呈弱阳性表达。细胞染色体众数介于23~137条之间。三倍体及亚三倍体细胞(46<染色体数≤69)占86%,为稳定的亚三倍体细胞系。裸鼠异体接种全部成瘤。   结论: 根据细胞系特征显示本细胞系是一新建的胃癌细胞系,将为以后的胃癌研究提供了一个很好的实验模型。
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