【摘 要】
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该论文主要发展了前人创立的用电喷雾质谱分析鉴定蛋白质的标准方法;在蛋白质组学研究中,创建了鉴定胶上染色斑点的标准方法,并应用于二维凝胶电泳分离后胶上实际斑点的鉴定.
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该论文主要发展了前人创立的用电喷雾质谱分析鉴定蛋白质的标准方法;在蛋白质组学研究中,创建了鉴定胶上染色斑点的标准方法,并应用于二维凝胶电泳分离后胶上实际斑点的鉴定.在此过程中,研究和讨论了样品前处理技术,证明样品脱盐和去除表面活性剂的必要性,并在以后的分析实践中使用最有效的HPLC-MS联用技术进行在线的前处理、分离和检测.在复杂的CID谱图解析方面,综合应用并讨论了Denovo测序方法和该实验室发展的序列模式相关的测序方法,有效地应用于谱图解析和数据库搜索.最后,该论文研究和讨论了热变性对蛋白的结构影响及对酶解效率的影响.比较研究了牛血清蛋白、溶菌酶、肌红蛋白三种蛋白质,在经过和不经过热变性酶解的质谱分析结果,比较了它们各自的酶解效率和在数据库中的匹配情况.阐明了热变性形成蛋白集结物的机理,并总体上增强蛋白与酶的作用,提高酶解效率.证实了酶解前蛋白进行热变性的必要性.该项研究是质谱在蛋白质结构分析中的一个有价值的应用.
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