【摘 要】
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本研究在前期PCR介导的信号标签随机突变库基础上,以感染小鼠为模型,筛选鉴定流产布鲁菌毒力相关基因。为进一步研究布鲁菌毒力相关基因的功能,构建了一系列用于布鲁菌克隆和表达外源基因的质粒。之后,对布鲁菌一个LysR家族调控子的功能进行详细阐明,为布鲁菌致病机制研究奠定基础。本文的主要结论是：1.共获得56株流产布鲁菌减毒突变株,鉴定53个毒力相关基因,其中,39个是本研究中新鉴定的基因。2.注释53
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本研究在前期PCR介导的信号标签随机突变库基础上,以感染小鼠为模型,筛选鉴定流产布鲁菌毒力相关基因。为进一步研究布鲁菌毒力相关基因的功能,构建了一系列用于布鲁菌克隆和表达外源基因的质粒。之后,对布鲁菌一个LysR家族调控子的功能进行详细阐明,为布鲁菌致病机制研究奠定基础。本文的主要结论是：1.共获得56株流产布鲁菌减毒突变株,鉴定53个毒力相关基因,其中,39个是本研究中新鉴定的基因。2.注释53个毒力相关基因,功能分类探讨相关基因可能与布鲁菌毒力之间的关系。3.构建一系列pTM质粒用于在布鲁菌中克隆外源基因,包括pTM1-Cm、pTM2-Amp和pTM3-Km。4.构建pGH-6x His和pZT-6x His质粒,为布鲁菌表达和诱导性表达外源基因提供条件。5.鉴定一个与布鲁菌毒力相关的LysR家族转录调控子LsrB蛋白,参与调控布鲁菌胞内存活和建立慢性感染。6.发现LsrB调控布鲁菌抵抗氧化应激、氮化应激、自然血清以及调控布鲁菌逃逸宿主免疫监控。7.揭示LsrB在根瘤菌目细菌中具有保守的共同调控机制。
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