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为了研究UC-MSCs与BMECs共培养的最适浓度比和最佳作用时间及其作用机制。本试验将P3代UC-MSCs与P3代BMECs按照浓度比例为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶50、1∶100、1∶1000、2∶1等不同比例随机混合培养，同时设立UC-MSCs与BMECs单纯培养组为对照组，并分别于0h，24h，48h，72h，96h，120h和144h时观察各组细胞的形态变化，用MTT法检测细胞增殖，测定细胞贴壁率，并检测EGF、bFGF、TGF-β、HGF、TNF-α、TNF-β和LD的表达水平，同时检测CcOⅠ、HK、LDH和PK的活性，来探究UC-MSCs与BMECs共培养的作用机制，从而为UC-MSCs在畜牧生产上的研究应用提供新的思路和理论依据。 结果显示:体外分离培养的UC-MSCs细胞形态均一、具有成纤维样细胞外观，排列紧密，有一定方向性;通过碱性磷酸酶染色后可见细胞呈深棕红色;能够被诱导为成脂、成骨细胞;将UC-MSCs和BMECs按照不同浓度比混合共培养后，细胞生长状态良好，无抑制作用;MTT检测增殖发现1∶2浓度组OD值最高，细胞增殖最快，明显高于单纯UC-MSCs组和单纯BMECs组，各组OD值在72h时均达到最高，随后下降;共培养后细胞贴壁率与时间成正比，其中1∶2浓度组细胞贴壁率最高，显著高于单纯BMECs组;UC-MSCs和BMECs按不同浓度混合共培养后，1∶2浓度组培养液上清中的EGF水平显著高于1∶1000组、单纯UC-MSCs组及单纯BMECs(P＜0.05)，且在72h、96h、120h显著高于0h(P＜0.05);1∶2组的TGF-α分泌水平最低，1∶1组、1∶2组和2∶1组显著低于单纯BMECs组(P＜0.05)，1∶1组、1∶2组、1∶3组、2∶1组TGF-β水平显著高于1∶1000组及单纯BMECs组(P＜0.05)，且72h时TGF-α和TGF-β分泌水平显著低于0h和144h(P＜0.05);1∶1组、1∶2组及2∶1组bFGF分泌水平显著高于1∶50、1∶100、1∶1000和单纯BMECs组（P＜0.05），且48h、72h的分泌量显著高于0h、24h、144h(P＜0.05);HGF分泌水平在各组之间差异均不显著，但1∶2组的分泌量最大，各组HGF分泌量在72h时最高，显著高于0h、24h、48h(P＜0.05);1∶1、1∶2、1∶3、1∶4浓度组HK的活性显著高于1∶1000、BMECs单纯培养组(P＜0.05)，且在72h、96h、120h时活性显著高于0h、24h、48h、144h(P＜0.05); LD的表达量在1∶2浓度组达到最高，1∶1、1∶2、2∶1浓度组显著高于BMECs单纯培养组(P＜0.05)，且在72h时与0h相比差异显著(P＜0.05);PK活性在1∶2浓度组达到最高，且1∶1、1∶2浓度组活性显著高于1∶1000、BMECs单纯培养组(P＜0.05)，且其活性随着时间增加逐渐增强，在72h时达到最高，显著高于0h、120h、144h（P＜0.05）;1∶1、1∶2、1∶3浓度组的LDH活性显著高于1∶1000和BMECs单纯培养组(P＜0.05)，且LDH活性随时间增加呈逐渐下降趋势，0h组与其他各组相比均差异显著(P＜0.05)，72h组与0h、24h、144h组相比均差异显著(P＜0.05);1∶2组TNF-α的表达量最低，显著低于1∶10、1∶50、1∶1000、UC-MSCs单纯培养组和BMECs单纯培养组(P＜0.05)，且浓度在0h-72h之间呈现降低趋势，并且在72h时达到最低，显著低于0h、96h、120h和144h时(P＜0.05);1∶1组、1∶2组、2∶1组的TNF-β表达量显著低于1∶10、1∶50、1∶100、1∶1000、UC-MSCs单纯培养组和BMECs单纯培养组(P＜0.05)，且表达量在72h达到最低，随后开始升高，48h、72h表达量显著低于0h、120h和144h时(P＜0.05);共培养组的CcOⅠ活性变化不大，除1∶100、1∶1000、2∶1组外，其余各个共培养组的CcOⅠ活性均显著低于BMECs单纯培养组(P＜0.05)，且其活性在72h时最低，显著低于除48h组之外的各组(P＜0.05)。 本试验研究得出以下结论:①本试验成功的在体外分离培养出奶牛脐带间充质干细胞。②本试验成功的建立了UC-MSCs和BMECs共培养体系，通过试验摸索发现UC-MSCs和BMECs比例为1∶2的浓度组，培养至第72h时各项指标最佳。③UC-MSCs和BMECs共培养能够促进共培养体系细胞增殖，提高细胞贴壁率。④UC-MSCs和BMECs共培养能够提高共培养体系中EGF、HGF、bFGF分泌水平，抑制TGF-α和TGF-β分泌水平。⑤UC-MSCs和BMECs共培养能够提高共培养体系的葡萄糖代谢水平。⑥UC-MSCs和BMECs共培养能够抑制共培养体系中CcOⅠ活性，降低TNF-α和TNF-β的分泌。