联合应用精氨酸和谷氨酰胺对LPS诱导大鼠肠道炎症的影响

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengliufeng
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本文比较研究了联合应用精氨酸和谷氨酰胺与单独应用精氨酸或谷氨酰胺对SD大鼠生长性能和血清中精氨酸、谷氨酰胺浓度的影响,以及对LPS诱导大鼠的抗氧化能力、肠道形态和肠道炎症发生的影响,为减少免疫应激等情况下导致的猪肠道炎症损伤提供新的方法,同时也为临床上合理应用精氨酸和谷氨酰胺治疗早期脓毒症等疾病病人提供新的方法。主要研究内容和结果如下:   试验一:试验选用28只体重(182.7±14g)的成年SD(Sprague-Dawley)大鼠,随机分为4个组:对照组(Control,n=7),灌服0.9%生理盐水;精氨酸组(Arg,n=7),灌服300mg/kg·d-1Arg;谷氨酰胺组(Gln,n=7),灌服300mg/kg·d-1Gln;精氨酸加谷氨酰胺组(AG,n=7),灌服150mg/kg·d-1Arg加150mg/kg·d-1Gln。正式试验持续14天,分别于试验开始和结束空腹称重,并统计每只大鼠采食量。试验结束时,大鼠断头采血,分析血清中精氨酸和谷氨酰胺浓度。结果表明,各试验组大鼠平均日增重(ADG)和日采食量(ADFI)之间无显著差异(P>0.05);与对照组相比,肠胃内补充精氨酸后大鼠血清中精氨酸水平有增加的趋势,但差异不显著(P>0.05),而补充谷氨酰胺对大鼠血清中谷氨酰胺和精氨酸水平无显著影响(P>0.05)。因此,肠胃内补充的大部分精氨酸和几乎全部谷氨酰胺可能都在肠道内代谢,而没有进入血液循环。   试验二:试验选用35只体重为180g左右的成年SD(Sprague-Dawley)大鼠,随机分为5个组:对照组A(ControlA,n=7),灌服0.9%生理盐水;对照组B(ControlB,n=7),灌服0.9%生理盐水;精氨酸组(Arg,n=7),灌服300mg/kg·d-1Arg;谷氨酰胺组(Gln,n=7),灌服300mg/kg·d-1Gln;精氨酸加谷氨酰胺组(AG.n=7),灌服150mg/kg·d-1Arg加150mg/kg·d-1Gln。试验期持续21天,其中预饲期7天,正式试验期14天。第13天晚上8时大鼠禁食,第14天上午8时灌胃,上午9时,Control B,Arg,Gln和AG试验组大鼠按4mgLPS/kg体重的标准腹腔注射LPS,而Control A大鼠注射等量生理盐水。腹腔注射后4小时,各试验组大鼠断头收集血液,分析血清中NO,NOS,SOD,ET-1和DAO水平,取肠道观察肠粘膜形态和分析细胞炎症因子TNF-a,IL-1β,IL-6,IL10mRNA表达水平。结果表明:   (1)LPS诱导大鼠血清中NO,NOS和SOD水平显著提高(P<0.05),而补充精氨酸和谷氨酰胺对LPS诱导大鼠血清中NO和NOS水平无显著影响(P>0.05),但显著提高了大鼠血清中SOD水平(P<0.05),表明补充精氨酸和谷氨酰胺提高了大鼠抗氧化能力。大鼠腹腔注射LPS后,血清中DAO水平显著降低(P<0.05),ET-1水平则显著提高了(P<0.05),而补充精氨酸或谷氨酰胺显著抑制了DAO水平的降低(P<0.05)和ET-1水平的提高(P<0.05),且联合应用精氨酸和谷氨酰胺的抑制作用最好。这一结果表明精氨酸和谷氨酰胺都具有缓解LPS对肠道的损伤,保护肠道屏障的作用,且联合应用精氨酸和谷氨酰胺作用优于单独应用精氨酸或谷氨酰胺。   (2)大鼠腹腔注射LPS后,空肠和回肠绒毛高度和隐窝深度显著降低了(P<0.05),杯状细胞和淋巴细胞显著增加(P<0.05),而Ar、Gln和AG组大鼠空肠和回肠绒毛高度显著高于Control B组(P<0.05),表明补充精氨酸或谷氨酰胺有效防止了LPS对大鼠肠道形态的损伤,而联合应用精氨酸和谷氨酰胺对肠道绒毛的保护作用优于单独应用某一种氨基酸。   (3)大鼠腹腔注射LPS后,空肠和回肠细胞炎症因子TNF-a,IL-1β,IL-6,IL10mRNA表达水平显著提高了(P<0.05)。Arg组大鼠回肠TNF-a mRNA表达量显著低于对照B组(P<0.05),Gln组大鼠回肠中TNF-a和IL-10 mRNA表达量显著低于对照B组(P<0.05),AG组空肠和回肠中TNF-a和IL-iβ mRNA表达量显著低于对照B组(P<0.05)。试验表明,肠胃内补充精氨酸或谷氨酰胺在一定程度上缓解了LPS诱导的大鼠肠道炎症反应,联合应用精氨酸和谷氨酰胺对炎症缓解作用优于单独使用某一种氨基酸。   这些结果表明,大鼠肠胃内补充的大部分精氨酸和几乎全部谷氨酰胺都被肠道利用,补充精氨酸和谷氨酰胺有效地提高了LPS诱导大鼠的抗氧化能力,减轻了LPS对肠道形态的破坏,保护了肠道屏障,缓解了LPS诱导的肠道炎症反应,且联合应用精氨酸和谷氨酰胺的作用优于单独应用精氨酸或谷氨酰胺。
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